【摘 要】
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目的 研究竹叶黄酮中的代表性单体物质荭草苷、异荭草苷、绿原酸和阿魏酸对CHO细胞线粒体功能的影响,以了解四种单体都对线粒体的损伤作用及作用差别,并从中找出早期细胞损伤指标,为生物活性物质的毒理学研究及单体活性物质的开发提供科学依据.方法 选用正常中国仓鼠卵巢细胞(CHO),采用CCK-8法检测细胞增殖情况,采用回归中概率单位计算IC50值.以IC50、1/2IC50值、1/4IC50值、1/8 I
【机 构】
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北京联合大学应用文理学院,北京100191
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目的 研究竹叶黄酮中的代表性单体物质荭草苷、异荭草苷、绿原酸和阿魏酸对CHO细胞线粒体功能的影响,以了解四种单体都对线粒体的损伤作用及作用差别,并从中找出早期细胞损伤指标,为生物活性物质的毒理学研究及单体活性物质的开发提供科学依据.方法 选用正常中国仓鼠卵巢细胞(CHO),采用CCK-8法检测细胞增殖情况,采用回归中概率单位计算IC50值.以IC50、1/2IC50值、1/4IC50值、1/8 IC50值作为实验剂量,作用细胞24 h后,流式细胞仪测定线粒体膜电位、试剂盒法测定细胞内ATP含量变化、Western blot检测细胞色素c的表达.结果 四种单体化合物作用于CHO细胞24 h后,CCK-8检测后计算得出IC50值可以看出,四种单体化合物对细胞存活率的影响虽不同,但毒性不大.绿原酸、阿魏酸、荭草苷与异荭草苷四种单体化合物的IC50值分别为：2857.36,1685.47,1883.76和2344.35μmol·L-1,以阿魏酸的毒性作用最大.不同剂量的四种单体对CHO细胞线粒体膜电位的影响的结果显示,与对照组比较,均在IC50剂量下能引起线粒膜电位明显降低,但四种物质之间无明显差别.随剂量增加,四种单体均引起细胞内ATP生成量逐渐降低,与空白组比较,IC50组细胞胞内ATP的生成减少差异显著或极显著；阿魏酸和荭草苷在1/2IC50组也有显著差异,而在1/4IC50候剂量下,四种单体作用产生的ATP与空白组比较均无显著性差异.不同剂量的四种单体化合物对细胞色素c释放的影响结果显示,与空白对照组比较,绿原酸与异荭草苷无明影响,阿魏酸与荭草苷在IC50组有统计学差异,阿魏酸在1/2 IC50剂量组也具有显著性差异.结论 四种植物活性物质在细胞毒性剂量下均能引起细胞线粒体功能指标改变,以ATP含量变化最明显改变,阿魏酸的细胞毒性最大且对线粒体功能指标的影响也最明显,荭草苷和异荭草苷次之,绿原酸最小.
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