【摘 要】
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为了解丝氨酸蛋白酶在皱纹盘鲍免疫调节方面中的作用.采用RT-PCR和RACE技术从皱纹盘鲍的肝脏组织克隆获得了丝氨酸蛋白酶(serine protease,Hdh-SP)基因cDNA全长序列,序列
【机 构】
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集美大学食品与生物工程学院,厦门市海洋功能食品重点实验室福建省海洋功能食品工程技术研究中心水产品深加工技术国家地方联合工程研究中心 福建厦门361021
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为了解丝氨酸蛋白酶在皱纹盘鲍免疫调节方面中的作用.采用RT-PCR和RACE技术从皱纹盘鲍的肝脏组织克隆获得了丝氨酸蛋白酶(serine protease,Hdh-SP)基因cDNA全长序列,序列分析结果显示HIdh-LAP cDNA全长共1107bp,包含5UTR 111bp,3UTR 39bp,ORF 957bp,编码319个氨基酸残基.通过序列比对结果显示,该氨基酸序列与太平洋牡蛎(Crassostrea gigos),栉孔扇贝(Azumapecten farreri),缢蛏(Sinonovacula constricta)马氏珠母贝(Pinctada fucata)中丝氨酸蛋白酶同源性分别为54％,50％,47％,40％.Hdh-SP基因编码蛋白的分子式为C1494H2302N426O448S21,预测其相对分子质量34.0kDa,理论等电点为6.89,属于亲水蛋白,预测其N-末端为信号肽.该蛋白的二级结构以延伸链和无规卷曲为主,其中α-螺旋占15.72％,无规卷曲占50.63％,延伸链占33.65％,.根据系统发育关系分析Hdh-SP与太平洋牡蛎丝氨酸蛋白酶具有较高的保守性并且亲缘关系最近.荧光定量PCR结果分析表明,其mRNA在皱纹盘鲍的肌肉、肝胰腺、性腺、血液、腮、外套膜等6个组织中均有表达,在肝脏中表达最多,性腺和肌肉次之,外套膜最少.研究表明丝氨酸蛋白酶参与鲍鱼免疫调节反应.
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