亚洲带绦虫膜联蛋白B2基因的表达、纯化及免疫学分析

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目的:对亚洲带绦虫膜联蛋白B2(Annexins B2)进行克隆表达及免疫学初步研究。 方法:利用在线生物信息学工具从亚洲带绦虫成虫cDNA文库中筛选出含有Annexins B2基因,并将该基因克隆到原核表达质粒pET-28a(+)中,在大肠埃希菌BL21/DE3中诱导表达,表达产物通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定,重组后的蛋白用His-镍蛋白纯化柱纯化,纯化的重组蛋白用蛋白印迹(Western blotting)进行免疫学分析。 结果:PCR,双酶切及DNA测序均显示重组体构建成功,并得到高纯度的蛋白,且该重组蛋白可被亚洲带绦虫、猪带绦虫及牛带绦虫病人血清识别,表明其具有免疫反应性。 结论:亚洲带绦虫成虫Annexins B2基因可在原核表达系统中获得具有免疫活性的高效表达,为进一步研究该蛋白的功能奠定了基础。
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