【摘 要】
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本研究将犬IL-2基因和弓形虫Rhombiod基因串联重组到大肠杆菌-分枝杆菌穿梭表达载体和整合表达载体中,构建重组质粒pMV261(361)-IL2-Rho,并将其转入卡介苗中,对表达产物
【机 构】
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吉林大学动物医学学院,长春 130062
【出 处】
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中国畜牧兽医学会兽医寄生虫学分会第十三次学术研讨会
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本研究将犬IL-2基因和弓形虫Rhombiod基因串联重组到大肠杆菌-分枝杆菌穿梭表达载体和整合表达载体中,构建重组质粒pMV261(361)-IL2-Rho,并将其转入卡介苗中,对表达产物进行SDS-PAGE电泳分析及免疫印迹鉴定.将构建成功的重组卡介苗pMV261-IL2-Rho和pMV361-IL2-Rho以及pMV261-Rho和pMV361-Rho分别经皮下免疫犬,检测体液以及细胞免疫水平变化.结果显示,各免疫组抗体水平随免疫次数增加而上升,重组卡介苗pMV261-IL2-Rho和pMV361-1L2-Rho免疫组与对照组差异极其显著(P＜0.01).Th1型和Th2型细胞因子进行检测,随着免疫次数增加,各试验组血清IL-2、IFN-γ、TNF-α水平呈上升趋势,三次免疫以后与对照组差异极其显著(P＜0.01),但PBS对照组、BCG对照组没有明显变化(P＞0.05).检测IL-4水平发现,所有组在免疫过程中,差异不显著(P＞0.05).体温检测显示,各免疫组犬的体温较对照组变化波动小.统计存活时间发现,免疫组与对照组生存时间差异显著(P＜0.05).结果表明,重组卡介苗对弓形虫的攻击有一定的免疫效果,IL-2有增强重组卡介苗的免疫效果.
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