PELP1调控ERα阳性乳腺癌细胞对紫杉醇敏感性的作用和机制研究

来源 :2015医学前沿论坛暨第十四届全国肿瘤药理与化疗学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ilovebaidoudou
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  目的:研究雌激素受体(Estrogen receptor, ER)辅助调节因子脯氨酸-谷氨酸-亮氨酸富集蛋白1 (proline-,glutamic acid-,leucine-rich protein 1,PELP1)参与调控ERα阳性乳腺癌细胞对紫杉醇(Paclitaxel,PTX)敏感性的作用与机制。方法:通过浓度递增筛选法分别在MCF-7、T47D乳腺癌细胞上建立PTX耐药株(MCF-7/PtR,T47D/PtR),MTT法检测细胞活力,比较在有无雌二醇(Estradiol,E2)、有无雌二醇-牛血清白蛋白(E2-BSA)、有无ER阻断剂氟维司群(Fulvestrant,Ful)、是否干扰PELP1表达、有无PI3K抑制剂LY294002条件下PTX对细胞的半数抑制浓度(IC50);Realtime-PCR、Western blot检测Erα、SRC-1、AIB1、PELP1、Akt、Bcl-2、Bad、Caspase3、Caspase8表达变化,Western blot检测Akt磷酸化、Caspase激活;免疫荧光检测PELP1/E2-BSA,PELP1/Erα,Erα/E2-BSA共定位,流式细胞术、TUNEL检测细胞凋亡;免疫组织化学检测原发性乳腺癌组织标本中Erα、PELP1、Aktser473、Bcl-2、Bad表达,做相关性分析。
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