目的:制备针对新城疫病毒F48E9株单克隆抗体，以用于NDV抗原变异研究及检测方法建立。 方法:用新城疫病毒F48E9株全病毒及原核表达的重组F48E9-NP蛋白免疫BALB/c小鼠，全病毒间接ELISA筛选杂交瘤细胞株。用免疫印迹和间接免疫荧光试验鉴定单抗反应原性，间接ELISA试验鉴定单抗与其他NDV毒株的交叉反应，并采用NP蛋白分段融合表达技术对单抗识别区域初步定位。 结果:共筛选到3株单抗杂交瘤细胞株3E7、2D11和4812，免疫印迹和间接免疫荧光试验分析表明，3株单抗均针对病毒NP蛋白的线性表位；单抗3E7、4812与基因Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅵ、Ⅸ、Ⅶ型共11株NDV均有反应性，单抗2D11仅与基因Ⅶ型中QY97、Mallard/CH/HLJ001/06和基因Ⅲ型中Mutkaswar株反应。单抗2D11识别NP基因开放阅读框C端的1303-1413处(37个aa)；单抗3E7、4812识别NP基因ORFC端的1372-1470处(共33个aa)。 结论:获得了针对NDV F48E9株NP蛋白的3株识别线性表位单抗，将在NDV抗原变异研究及检测方法建立方面进行应用。