抗骨增生胶囊含药血清对人软骨细胞增殖及相关基因表达的影响

来源 :第六届全国骨质疏松及代谢性骨病学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:a272437762
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目的:通过观察抗骨增生胶囊含药兔血清对体外培养的人关节软骨细胞的影响,研究抗骨增生胶囊治疗骨关节炎的作用机理。 方法:8只新西兰白兔,随机分为中药组(TCM组)和空白对照组(NC组),每组4只,中药组抗骨增生胶囊按1.1g/kg体重每日两次灌胃,空白对照组生理盐水灌胃,持续5天,制备含药兔血清及不含药兔血清。全膝置换术中取下软骨块,消化、分离人软骨细胞培养至第2代并长满80%,分为加药组和对照组,分别加入含药兔血清及不含药兔血清,每日换液;分别于1d、3d、5d和7d做以下各项检测:1.细胞形态观察;2.四甲基偶氮唑盐(MTT)法测细胞活性;3.应用array-ELISA方法测定细胞上清中肿瘤坏死因子-a(TNF-α)和白细胞介素-1b(IL-1β);4.real time RT-PCR检测Ⅰ型胶原、Ⅱ型胶原、基质金属蛋白酶-13及蛋白聚糖的基因表达情况。 结果:1.相差显微镜下观察,加药组软骨细胞大多呈圆形、椭圆形或梭形外观,细胞生长快于对照组;2.MTT 结果加药组各个时间点的OD值均明显高于对照组的相应时间点,差异均有统计学意义(P<0.01);3.array.ELISA.结果加药组各个时间点细胞上清中TNF-α和IL-1bβ均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.01);4.real time RT-PCR结果与对照组相比,加药组Ⅱ型胶原和aggrecan的基因表达增高,Ⅰ型胶原和MMP-13的基因表达降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。 结论:抗骨增生胶囊具有促进软骨细胞增殖,减轻炎性细胞因子分泌,促进Ⅱ型胶原和aggrecan的合成及相关基因表达,抑制Ⅰ型胶原和MMP-13的合成及相关基因表达,对关节软骨起保护和修复作用。
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