论文部分内容阅读
目的 研究中药复方大柴胡颗粒(DCHKL)对四氧嘧啶(AXN)致乳大鼠原代胰岛细胞损伤的保护作用.方法 用胶原酶消化法分离纯化培养乳大鼠胰岛细胞,在细胞板内加入含AXN (4.0mmol/L-终浓度)的10%胎牛血清(fetal bovine serum,FBS) RPMI 1640培养液,加入大柴胡颗粒高剂量、中剂量、低剂量含药血清,同时设10% FBS RPMI 1640培养液作正常对照,格列美脲作阳性对照.在37℃、5% CO2饱和湿度培养24 h后,在显微镜下观察胰岛细胞的形态,并采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测大柴胡颗粒对原代乳大鼠胰岛细胞活性的影响,用ELISA法检测其对原代乳大鼠胰岛细胞胰岛素基础分泌量、高糖刺激胰岛素分泌量的影响,采用流式细胞仪检测胰岛细胞的凋亡率,向时以RT-PCR检测胰岛细胞的抗凋亡基因(bcl-2)和促凋亡基因(bax)的表达.结果 大柴胡颗粒含药血清能明显促进乳大鼠原代胰岛细胞细胞的活性(p<0.01);同时胰岛素基础分泌量以及高糖刺激胰岛素分泌量明显上升(p<0.01);能抑制胰岛细胞的凋亡,降低细胞的凋亡率(p<0.01);并且出现上调Bcl-2基因的表达,下调Bax基因表达.结论 大柴胡颗粒能促进乳大鼠胰岛细胞的体外增殖,增加胰岛细胞基础分泌量以及高糖刺激胰岛素分泌量,同时抑制胰岛细胞的凋亡,并且上调抗凋亡基因Bcl-2表达,下调促凋亡基因Bax表达.