【摘 要】
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目的：比较正常牙髓干细胞、炎症牙髓干细胞及LPS处理的正常牙髓干细胞炎症因子的表达情况,碱性磷酸酶活性,及成牙/成骨分化相关蛋白基因的表达,检测炎症牙髓干细胞生物学
【机 构】
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南京医科大学口腔疾病研究江苏省重点实验室
【出 处】
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中华口腔医学会牙体牙髓病学专业委员会第五次全国牙体牙髓病学临床学术研讨会
论文部分内容阅读
目的：比较正常牙髓干细胞、炎症牙髓干细胞及LPS处理的正常牙髓干细胞炎症因子的表达情况,碱性磷酸酶活性,及成牙/成骨分化相关蛋白基因的表达,检测炎症牙髓干细胞生物学行为的改变.方法：酶消化法及有限稀释法分离培养多克隆来源的正常牙髓干细胞及炎症牙髓干细胞,α-MEM培养,细胞角蛋白(CK)、波形丝蛋白(Vimentin)免疫荧光染色,验证其间充质干细胞特性.实时定量逆转录聚合酶链式反应实验(Real-time RT-PCR)检测各组细胞炎症因子(IL-1β、TNF-α)的表达情况.蛋白免疫印迹实验(Western blot)及Real-time PCR检测牙向/骨向分化相关基因蛋白(RUNX2/RUNX2、DSP/DSP、OSX/OSX、OPN/OPN、OCN/OCN)的表达情况.结果：两组细胞呈CK染色阴性,Vimentin染色阳性.iDPSCs与LPS作用的nDPSCs的炎症因子(IL-13、TNF-α)的表达水平均高于nDPSCs组,差异具有统计学意义(P＜0.05).但其碱性磷酸酶活性及成牙/成骨相关基因蛋白(RUNX2/RUNX2、DSPP/DSP、OSX/OSX、OPN/OPN、OCN/OCN)的表达水平均较nDPSCs组降低.结论：本实验从炎症牙髓组织中成功分离出炎症牙髓干细胞.经鉴定,分离出的多克隆牙髓细胞为间充质来源干细胞,与正常牙髓组织来源的牙髓干细胞相比,炎症牙髓组织来源的牙髓干细胞,及LPS处理后的正常牙髓干细胞的炎症因子IL-1β,TNF-α的表达水平明显增高,但其成牙/成骨能力降低.
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