【摘 要】
：
目的：双酚A 是一种人工合成的类雌激素化工原料,用于聚碳酸酯、环氧树脂等日用品的生产,我们前期研究发现低剂量双酚A 可促进卵巢癌细胞的迁移、侵袭及EMT(上皮间质转化),但机制未明.本研究拟探讨低剂量双酚A 通过其响应的lncRNA 促进卵巢癌进展的精细分子机制.材料与方法：研究利用CCK-8 法检测卵巢癌细胞的增殖；运用划痕实验、Transwell 侵袭实验检测卵巢癌细胞迁移和侵袭能力的变化；采
【机 构】
：
浙江大学公共卫生学院卫生毒理系,浙江,杭州,310058
【出 处】
：
中国毒理学会表观遗传毒理专业委员会第一次学术大会
论文部分内容阅读
目的：双酚A 是一种人工合成的类雌激素化工原料,用于聚碳酸酯、环氧树脂等日用品的生产,我们前期研究发现低剂量双酚A 可促进卵巢癌细胞的迁移、侵袭及EMT(上皮间质转化),但机制未明.本研究拟探讨低剂量双酚A 通过其响应的lncRNA 促进卵巢癌进展的精细分子机制.材料与方法：研究利用CCK-8 法检测卵巢癌细胞的增殖；运用划痕实验、Transwell 侵袭实验检测卵巢癌细胞迁移和侵袭能力的变化；采用Western、qPCR 和免疫荧光技术检测卵巢癌细胞EMT 的改变；使用生信预测结合Luciferase、qPCR、Western 等细胞分子技术确认双酚A 响应lncRNA-CASC15 的分子轴,利用小动物荧光活体成像技术在动物模型中加以验证,并运用生信数据库结合本地卵巢癌患者样本进一步分析该分子轴对卵巢癌进展的影响.结果：低剂量双酚A 对卵巢癌细胞的增殖能力无显著影响,但可以显著促进卵巢癌细胞的迁移、侵袭及EMT.低剂量双酚A 响应的lncRNA-CASC15,可通过miR-23-24簇及其靶基因SMAD3,形成反馈性的CASC15-miR-23-24 簇-SMAD3 分子环路,从而全面调控卵巢癌细胞的迁移、侵袭及EMT,卵巢癌动物转移瘤模型和卵巢癌人群数据库分析进一步验证了该分子轴的作用及功能.结论：CASC15-SMAD3 分子轴在低剂量双酚A 促进卵巢癌细胞的迁移、侵袭及上皮间质转化中发挥了重要作用,该分子轴的发现可能会为低剂量环境类雌激素促卵巢癌进展的防控提供新的靶标及策略.
其他文献
目的 镉被国际癌症研究机构列为Ⅰ类致癌物,但其遗传毒性有限,因此表观遗传途径被认为是镉致癌机制之一.环状RNA 是近年来表观遗传研究的热点,但其在镉致肺癌中的作用机制尚不明确.本研究旨在探讨环状RNA 在镉致支气管上皮转化中的作用及机制.方法 以低剂量镉(2.0 μM)染毒20 周的人支气管上皮细胞BEAS-2B 为模型,高通量测序筛选环状RNA；通过慢病毒和质粒干预进行功能验证；平板克隆实验、细
目的：探讨Lnc-ENST00000556926 对煤焦沥青提取物(coal tar pitch extracts,CTPE)诱导的恶性转化永生化人支气管上皮细胞株BEAS-2B 细胞的影响,为从长链非编码RNA(Long non-coding RNAs,LncRNAs)的角度探讨恶性转化的机制提供理论依据.方法：采用2.4μg/mL CTPE 对BEAS-2B 细胞染毒30 代(CTPE30),
目的：在氢醌诱导的TK6 恶性转化细胞和苯暴露工人,探讨长链非编码RNA(lncRNA)FAS-AS1 与DNMT3b 相互调控作用机制及其对FAS 基因的表达影响的分子机制.方法：以正常的TK6 淋巴母细胞和氢醌诱导的TK6 恶性转化细胞、120 例苯作业工人及其对照为苯暴露研究对象；反转录实时荧光定量PCR 检测白血病相关长链非编码RNA、mRNA 的表达；蛋白质免疫印迹法检测蛋白质的表达；C
目的：近年来肺癌以其不断攀升的发病率和死亡率迅速成为全球范围内严重威胁人类健康的恶性疾病之一。新近发现的原癌基因PPP1R13L 基因在包括肺癌在内的多种肿瘤组织中均呈高表达,作为P53 的抑制剂,其可促进肿瘤在体内的生长。但PPP1R13L的作用是多方面,有研究发现在未转化的细胞中该基因发挥抑癌作用。本研究提出PPP1R13L 不但可抑制P53 的表达,而且两者存在负反馈调控,PPP1R13L
目的：有研究表明MCL-1 在癌症中上调,并成为癌症治疗的靶点.MCL-1 是如何上调的,MCL-1 上调是否在致瘤过程中起作用尚不清楚.砷和苯并(a)芘(BaP)是公认的肺致癌物,我们前期报道了砷和BaP 联合暴露在诱导肿瘤干细胞(CSC)样特性和肺肿瘤发生中发挥了协同作用.本研究针对MCL-1 作用的潜在机制进行了进一步研究.方法：采用无血清悬浮培养成球实验和裸鼠肿瘤发生实验测定砷与BaP 共
目的：四溴双酚A(TBBPA)是目前应用最多的一种溴系阻燃剂和环境内分泌干扰物,在环境和人体样本中普遍检出.TBBPA 为2A 级致癌物,与其相关性最明确的是子宫内膜癌(EC).然而目前TBBPA 诱发EC 发展恶化的分子机理尚不明确.方法：本研究围绕肿瘤微环境中肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)表型变化,构建巨噬细胞和EC细胞间接或直接共培养模型,阐明环境浓度TBBPA 通过干扰肿瘤微环境变化,进而介
目的：评估重金属暴露与结直肠癌遗传风险之间的关系,研究环境因素与遗传因素对结直肠癌发生发展的影响.方法：采用电感耦合等离子体质谱法(Inductively coupled plasma mass spectrometer,ICP-MS)检测结直肠患者与正常对照人群血浆中56 种重金属的水平.采用主成分分析(Principal component analysis,PCA),正交偏最小二乘-判别分析
背景机体肿瘤在发生发展过程中,面临多种不利环境压力可引起细胞生理进程失调,会诱发内质网应激(ER stress)和未折叠蛋白反应(UPR)活化,可以促进或抑制癌症进展,但其机制目前尚无定论。近年来,大量研究已揭示LncRNA 在癌症中存在异常表达现象,可作为癌基因或抑癌基因影响癌症发生发展的进程,但目前其在内质网应激中的作用还不清楚。目的 探讨LncRNA-ERSR 在皮肤鳞癌中调控内质网应激从而
目的：环状RNA在食管癌的发生发展中具有重要的调控作用,由于其稳定闭合环状结构而可能成为潜在早期诊断和治疗的生物标志物.本研究通过干预人正常食管上皮Het-1A细胞中hsa_circ_0063865的表达,探索该环状RNA在食管上皮细胞恶性转化过程中的影响,以期为深入研究环状RNA在食管癌发生发展中的作用及早期生物标志物的筛选提供相关参考.方法：将hsa_circ_0063865过表达和低表达慢病
目的：在氢醌诱导TK6 恶性转化细胞和苯暴露工人中,揭示DNMT1 在激活lncRNA UCA1 表达过程的DNA 甲基化机制.方法：以正常的TK6 淋巴母细胞和氢醌诱导TK6 恶性转化细胞、苯暴露工人作为研究对象,反转录实时荧光定量PCR 检测UCA1 的表达；CRISPR/CAS9 双载体慢病毒转染系统构建DNMT1、DNMT3b 敲除细胞；蛋白质免疫印迹检测蛋白表达；甲基化特性PCR(MSP