目的本课题组前期研究工作表明,完全弗氏佐剂(complete freund’s adjuvant,CFA)诱导大鼠炎症痛模型中,背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)周期素依赖性蛋白激酶5(cyclin-dependent kinase 5,Cdk5)活性增强,并参与炎症热痛觉敏化的形成。本研究旨在进一步对Cdk5激活的下游信号分子进行探讨,证明瞬态感受器电位香草酸受体1(Transient Receptor Potential Vanilloid-1,TRPV1)存在网格蛋白(clathrin)/发动蛋白(dinamin)依赖的组成型内吞,Cdk5可通过磷酸化适配器蛋白Adaptor protein complex 2的μ亚基(AP2μ2)第45位丝氨酸干扰TRPV1的内吞进而调控炎症热痛觉敏化。方法通过生物素标记及免疫荧光染色检测TRPV1在膜表面的分布及内吞现象,GST pull-down及免疫共沉淀检测TRPV1与AP2μ2蛋白的相互作用,体外同位素激酶实验检测Cdk5对AP2μ2的磷酸化,鞘内给药及CFA炎症痛模型观察AP2μ2的S45突变对大鼠痛行为的影响,钙成像实验检测DRG膜表面TRPV1的功能。结果 (1)TRPV1存在组成型内吞现象。(2)TRPV1的内吞是通过Clathrin/Dynamin依赖的途径完成的。(3)TRPV1的内吞需要与AP2μ2相互作用。(4)Cdk5活性影响TRPV1内吞过程。(5)Cdk5能够磷酸化AP2μ2第45位丝氨酸。(6)干扰Cdk5对S45的磷酸化可使TRPV1的内吞增多。(7)大鼠鞘内给予靶向S45的融合肽,可明显减缓其CFA诱导的炎症热痛觉敏化行为。(8)急性分离鞘内给药的大鼠的DRG,TAT-S45组的钙内流信号比TAT-S45A对照组降低。结论 TRPV1存在clathrin/dymain/AP2μ2依赖的组成型内吞,Cdk5通过磷酸化AP2μ2的S45干扰TRPV1的内吞,使其膜上分布增多功能增强,进而参与CFA诱导的热痛觉敏化的形成。这一发现有可能为镇痛药物研发提供新的靶点。