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目的:研究不同自噬水平对上颌窦黏膜间充质干细胞(maxillary sinus mesenchymal stem cells, MSMSCs)成骨能力变化的影响。材料与方法:分离培养3周龄SPF级SD大鼠上颌窦黏膜间充质细胞,使用第3代MSMSCs加入含有1nM、10nM、50nM、100nM的雷帕霉素(RAPA,rapamycin)诱导MSMSCs48小时,电镜检测自噬小体形成数量,MDC染色法检测自噬水平。自噬诱导48小时后成骨诱导液14天,碱性磷酸酶(ALP,alkaline phosphatase)定量检测ALP活性,茜素红染色检测钙化结节,实时荧光定量PCR检测诱导后细胞成骨相关基因的表达差异,Wetern blot检测诱导后成骨相关蛋白表达的差异。结果:[1]RAPA诱导48小时后,1nM、10nM、100nM、1000nM组透射电镜下形成数量相比对照组依次增加。MDC染色法荧光倒置显微镜下可见1nM、10nM、100nM、1000nM组着色依次增加。[2]成骨诱导14d后,碱性磷酸酶活性结果为1nM组(0.992±0.283),10nM组(1.398±0.312),100nM组(1.193±0.245),1000nM组(0.488±0.384),对照组(0.985±0.211)。10nM组和100nM组ALP活性较对照组表现明显促进(p﹤0.05),1000nM组ALP活性较表照组出现明显抑制(p﹤0.05)。矿化结节数量10nM组>100nM组>1nM组>1000nM组,1nM组矿化结节数量和对照组相近。[3]Runx-2基因相对表达量1nM组(1.103±0.243),10nM组(1.462±0.154),100nM组(1.282±0.223),1000nM组(0.652±0.218),其中10nM组较对照组(1.0±0.0)显著表达(p﹤0.05),1000nM组较对照组显著抑制(p﹤0.05);OPN基因相对表达量1nM组(1.378±0.295),10nM组(3.632±0.312),100nM组(2.865±0.303),1000nM组(0.237±0.288),其中10nM组较对照组(1.0±0.0)显著表达(p﹤0.05),1000nM组较对照组显著抑制(p﹤0.05);OCN基因相对表达量1nM组(1.034±0.198),10nM组(1.948±0.217),100nM组(1.865±0.204),1000nM组(0.366±0.281),其中10nM组较对照组(1.0±0.0)显著表达(p﹤0.05),1000nM组较对照组显著抑制(p﹤0.05)[4]RUNX2蛋白相对表达量10nM组>100nM组>1nM组>1000nM组;OPN蛋白相对表达量10nM组>100nM组>1nM组>1000nM组;OCN蛋白相对表达量10nM组>100nM组>1nM组>1000nM组。结论:研究结果显示自噬具有调节大鼠MSMSCs成骨分化的能力。低浓度的RAPA(10nM、100nM)促进大鼠MSMSCs的成骨分化;高浓度的RAPA(1000nM)抑制大鼠MSMSCs的成骨分化。这提示在上颌窦提升术的过程中可以通过调节上颌窦黏膜内的间充质干细胞的自噬水平改变上颌窦内的骨生成量。