黏细菌抗凝溶栓双功能蛋白MF-1的纯化及其酶学性质研究

来源 :第七届全国生化与生物技术药物学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhuqs
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目的:对黏细菌Angiococcus sp.的抗凝溶栓双活性蛋白MF-1进行纯化、鉴定并对其酶学性质进行初步研究。方法:采用丙酮分级沉淀法、DEAE-Sepharose离子交换层析和Sephadex G-50分子筛层析对发酵液进行纯化,用SDS-PAGE和等点聚焦电泳对其进行鉴定,并用纤维蛋白平板法和水解酪蛋白法对其酶学性质进行检测。结果表明:经过一系列的纯化步骤分离得到该蛋白分子量为32kDa,等电点为8.5,酶的比活力为30761.57IU/mg,活性回收率为13.9%;溶栓活性的最适反应温度为35℃,最适反应pH为8.0;抗凝时间大于10min,且酶活性十分稳定,在35℃下保温72h后仍有89%活性。结论:首次从黏细菌中分离得到具有较高抗凝和溶栓双活性的MF-1蛋白,且稳定不易失活,具有开发成为创新溶栓药物的潜力。
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目的:分析羊栖菜多糖经Ca2+通路对S180荷瘤小鼠红细胞膜功能的影响。方法:建立肿瘤动物模型,分高、中、低剂量腹腔给予羊栖菜多糖7天,采集红细胞,制备红细胞悬液,运用激光共聚焦扫描技术测定荷瘤小鼠红细胞内[Ca2+]的变化;运用相关试剂盒测定红细胞膜Na+,K+-ATPase及Ca2+,Mg2+-ATPase活性的变化。结果:羊栖菜多糖能降低荷瘤小鼠红细胞内[Ca2+],增强膜表面Na+,K+-
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凝血因子V(FV)在凝血途径中的生理作用和在血栓与出血性疾病中的病理作用的研究已经有60多年的背景。之前对FV在凝血共同途径中的调控机制均做过多种假设。现在随着研究的深入和研究方法的提高,FV的部分晶体结构研究有了新进展,FV的作用机制也有了新的解释。现对FV的功能结构和突变的致病机理以及FV检测在疾病诊断中的应用等方面综述如下。
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