目的 利用肠道菌群体外温孵法确定大鼠肠道内细菌对灵仙新苷的代谢，并确定代谢产物的化学结构，初步阐明灵仙新苷在大鼠肠道内的代谢途径。方法 制备肠道菌群模型，灵仙新苷与肠道菌群培养液在37℃恒温培养箱中振荡培养，培养开始前及开始后3、6、12、24 h的培养液经蛋白沉淀处理，通过色谱分离确定代谢物的种类，采用多级MS轰击碎片的方式确定代谢产物的化学结构，使用LC/MS对代谢产物进行半定量分析。结果 灵仙新苷在大鼠肠道菌群中被广泛的代谢；通过给药培养液色谱图和空白培养液色谱图对比鉴别出了8个代谢产物，其中M1、M2、M3和M5为主要代谢产物；利用LC-Q/TOF MS确定了8个代谢物的结构，代谢物均为灵仙新苷的脱糖水解产物；半定量分析显示M1、M2、M3和M5随着温孵时间的延长，生成量也随着增加。结论 灵仙新苷在大鼠肠道菌群中被广泛代谢，初步确定8个脱糖水解产物，其药效的发挥可能依赖于灵仙新苷及其代谢物的协同作用。