CKIP-1基因干扰通过Wnt3a/β-catenin信号通路促进大鼠下颌骨牵张成骨

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目的:研究siRNA干扰CKIP-1对大鼠下颌骨牵张成骨新骨形成的影响。方法:包括体内实验和体外实验两部分。体内实验对24只雄性SD大鼠实施右侧下颌骨牵张成骨,牵张期开始前将其随机分为3组:实验组在牵张区局部注射si-CKIP-1/壳聚糖,阴性对照组在牵张区局部注射si-NC/壳聚糖,空白对照组在牵张区局部注射PBS。固定期结束后取材,对牵张间隙新生骨痂进行大体形态观察、MicroCT分析、HE染色、免疫组织化学染色。体外实验分离培养大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),随机分为3组并相应地加入si-CKIP-1/壳聚糖、si-NC/壳聚糖或PBS,然后进行MTT实验、细胞凋亡实验、茜素红染色、PT-qPCR、Western Blot检测。结果:大鼠牵张成骨实验发现实验组新骨形成在数量和质量上都明显优于另外两组。siRNA干扰可显著抑制CKGP-1在新生骨组织中的表达(P<0.05),Wnt3a、β-catenin和OCN的表达显著高于另外两组(P<0.05)。体外实验发现干扰CKIP-1对BMSCs的细胞凋亡有显著抑制作用(P<0.05),干扰CKIP-1后BMSCs的成骨分化能力明显增强,并且Wnt3a、β-catenin和OCN在基因和蛋白质水平上都显著上升(P<0.05)。结论:干扰CKIP-1可能通过调控Wnt3a/β-catenin信号通路促进大鼠下颌骨牵张成骨的新骨形成。CKIP-1可能成为siRNA治疗促进骨再生的潜在靶点。
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