药物的安全性是贯穿药物研发和临床使用的核心环节，药物导致的毒性反应不仅是上市药物召回的最直接原因，也是临床用药有效性和使用范围的限制因素。近年来，随着研究的不断深入，模式生物斑马鱼已经成为药物毒性研究的首选模型，并且在药物筛选、毒性研究、化合物结构优化等领域均发挥着愈来愈重要作用。但由于斑马鱼鱼体对药物的吸收差异可能导致不同的毒性反应，因而本研究拟在实验中同时监测药物在鱼体内浓度来减少药物毒性试验中假阳或阴性结果。本研究以抗生素为目标药物，建立了用于检测斑马鱼体内四类不同极性药物的LC-MS 定量分析方法，通过定量药物在鱼体内的浓度，进而考察不同极性药物的毒性反应与药物吸收之间的关系。本实验采用MRM 检测方式，特异性好、灵明度高，样品前处理方法简单，四类药物的方法精密度RSD 均小于10％，样品回收率均高于60％，没有明显的基质抑制或增强效应，样品在4℃放置24 稳定性RE 均小于15％，满足生物样品的定量分析方法要求，该定量分析方法适用于斑马鱼实际样品的检测，可用于药物毒性与其体内浓度的研究，并且为进一步药物毒性的深入研究提供技术依据。