【摘 要】
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根据GenBank中vt1、vt2毒素基因序列设计合成4对引物,以大肠杆菌O157菌株DNA为模板,扩增vt1、vt2,从只具有vt2的菌株中诱导释放噬菌体,以噬菌体DNA为模板进行PCR扩增,获得vt2、vt2-A、vt2-B 3条特异性DNA带;将vt2-A、vt2-B扩增产物纯化后,分别插入pMD18-T载体,测序结果与相应序列比较,vt2-A和vt2-B亚单位的基因序列与GenBank中编
【机 构】
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上海交通大学农业与生物学院,上海,201101
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根据GenBank中vt1、vt2毒素基因序列设计合成4对引物,以大肠杆菌O157菌株DNA为模板,扩增vt1、vt2,从只具有vt2的菌株中诱导释放噬菌体,以噬菌体DNA为模板进行PCR扩增,获得vt2、vt2-A、vt2-B 3条特异性DNA带;将vt2-A、vt2-B扩增产物纯化后,分别插入pMD18-T载体,测序结果与相应序列比较,vt2-A和vt2-B亚单位的基因序列与GenBank中编码vt2毒素的A、B亚单位的核苷酸序列(X07865,NC-002655,BA000007,AF291819)的同源性分别为98％-99％、96％-100％,确定vt2位于噬菌体,并为进一步研究大肠杆菌O157中vt噬菌体的毒力转导、vt2毒素的表达和应用奠定基础.
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