猪传染性胃肠炎病毒S、N基因核酸疫苗的构建与免疫原性研究

来源 :中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lnnyhonyy
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本研究采用RT-PCR扩增TGEV SC-H株S基因5’端主要抗原位点片段和N基因,并将其插入真核表达载体pVAx1,构建单独与嵌合表达S、N基因的pVAX-S、pVAX-N、pVAX-S-N三种重组质粒。通过脂质体将重组质粒转染COS-7细胞,利用间接免疫荧光检测目的基因的表达情况。将6周龄NIH小鼠随机分为5组,分别于腿部肌肉注射重组质粒pVAX、pVAX-S、pVAX-S-N、pVA-S+pVAX-N与pVAX-S+pVAX,共免疫三次,间隔2周。通过间接ELISA以及流式细胞仪分别检测免疫小鼠血清中特异性TGEV IgG抗体和外周血T淋巴细胞亚群数量。结果显示,重组质粒构建正确且在COS-7细胞中得以表达。pVAX-S+pVAX-N质粒混合免疫组小鼠后与pVAX-S+pVAX质粒混合对照组相比,可有效促进外周血T淋巴细胞亚群数量和血清中特异性抗体水平的增加,而pVAX-S-N免疫组小鼠与pVAX-S组比较,未能起到提高血清中特异性抗体水平的和外周血T淋巴细胞亚群数量作用。以上结果表明S、N基因的联合应用可有效加强TGEV核酸疫苗的免疫效力,但这种增强作用与S、N基因联合应用的方式直接相关。
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