吸烟人群血清microRNA差异表达研究

来源 :中国毒理学会生化与分子毒理专业委员会学术会议暨环境内分泌干扰物的毒理学研究新技术新方法研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jacker0001
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  目的:通过研究血清miRNA在正常人群和吸烟人群间的表达变化,阐明香烟暴露条件下血清miRNA表达水平的变化趋势.其次,分析比较血清特异性的miRNA表达变化与吸烟指数之间的剂量效应相关关系. 方法:对健康体检的男性人群进行吸烟问卷调查,入选健康吸烟组100例,入选健康不吸烟组49例.采集、分离获得各组入选对象的空腹血清.选取健康吸烟组和健康不吸烟组血清样品各10例,分别提取样品中的RNA.采用Exiqon的miRCURYTM LNA Array(v.16.0)进行基因表达谱检测,获取各组miRNA表达谱,分别比较两组间miRNA表达谱的差异性.分别选取健康不吸烟组、健康吸烟组各30例样品,对芯片结果显示呈三倍及以上差异表达的hsa-miR-7-5p,hsa-miR-502-3p,hsa-miR-129-2-3p、hsa-let-7i-3p和hsa-miR-196a-3p-等5个miRNA进行实时定量PCR验证.验证后选取显著下调表达的hsa-let-7i-3p miRNA,分别增加健康不吸烟组、吸烟组标本例数进行实时定量PCR检测,并结合吸烟指数变化,分析比较hsa-let-7i-3p表达水平与吸烟指数变化的关系. 结果:miRNA芯片表达谱结果显示,健康吸烟组与健康不吸烟组比较有105个miRNA呈三倍及以上差异性表达,其中上调和下调表达的miRNA分别为32个、75个.根据miRNA芯片结果选取hsa-miR-7-5p, hsa-miR-502-3p,hsa-miR-129-2-3p、hsa-let-7i-3p、hsa-miR-196a-3p等miRNA进行初步验证,结果发现,hsa-let-7i-3p在健康吸烟组与健康不吸烟组比较中,呈显著下调表达,差异具有统计学意义,hsa-let-7i-3p与吸烟指数的表达水平成负相关. 结论:吸烟可诱导人血清miRNA的差异表性表达,表达谱以差异性下调表达为主;吸烟可诱导血清hsa-let-7i-3p持续性下调表达,与吸烟指数呈负相关.
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