【摘 要】
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Duchenne dystrophies(DMD)是人类常见的X染色体连锁隐性遗传病,至今尚无有效的治疗方法.DMD由人类Dystrophin基因突变引起,其突变机制复杂,探索简便、准确的基因突变检测技术是DMD研究的热点之一.基因诊断已经被广泛应用到DMD的临床研究中,并且在确诊患者、筛查携带者、产前诊断以及指导基因治疗等方面取得了较大进展.本文介绍了一下几个DMD分子诊断新技术：1、聚合酶链反
【出 处】
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中华医学会2012年医学遗传学年会暨全国第十一次医学遗传学学术会议
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Duchenne dystrophies(DMD)是人类常见的X染色体连锁隐性遗传病,至今尚无有效的治疗方法.DMD由人类Dystrophin基因突变引起,其突变机制复杂,探索简便、准确的基因突变检测技术是DMD研究的热点之一.基因诊断已经被广泛应用到DMD的临床研究中,并且在确诊患者、筛查携带者、产前诊断以及指导基因治疗等方面取得了较大进展.本文介绍了一下几个DMD分子诊断新技术：1、聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)Dystrophin基因的缺失集中在两个热点区域：一个是中央区,包括外显子44～52,约占总缺失的70％；另一个是5端,包括外显子2～20,约占总缺失的30％.这种缺失热点区域是多重PCR技术的基础,该技术是一个简便快速的方法.2、短片段重复序列(short tandem repeat,STR)也称微卫星DNA序列,Oudet等及Beggs等发现肌养蛋白基因3非翻译区的(CA)n STR序列在白种人中具有长度多态性,其杂合率为35％,多态信息含量(polymorphism information content,PIC)为0.46.该序列分析也是一个较为不错的方法.3、多重连接依赖式探针扩增(multiplex ligation-dependent probe amplification,MLPA)Schouten等于2 0 0 2年在MAPH(Multiplex amplifiable probe hybridisation)技术的基础上改进并设计了MLPA.它是利用简单的杂交、连接、PCR扩增反应,于单一反应管内同时检测最多4 0个不同的核苷酸序列的拷贝数变化.这是一个较新的DMD诊断新技术.4荧光原位杂交(fluorescent in situ hybridization,FISH)及衍生技术 Bunyan等于1995年率先将该方法运用于dystrophin基因缺失的嵌合体研究,并在后来的研究中得以运用.在国内,丁显平等采用FISH的衍生技术PRINS技术检测基因缺失型DMD/BMD携带者也是一个切实可行的诊断方法.5、基因芯片：ardy等利用基因芯片技术对DMD缺失型突变进行了检测.针对易缺失外显子备出一块417阵列的DNA芯片,DNA样品与之杂交,通过对荧光杂交信号的检测分析,可以发现对应的缺失.近年来,有研究人员将比较基因组杂交方法与基因芯片技术结合,称为基于基因芯片的比较基因组杂交技术(array-based comparative genomic hybridization,aCGH),也是诊断DMD的新技术.
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背景与目的 肌萎缩侧索硬化(ALS)因具体发病机制不甚明了,至今尚无有效治疗药物.患者通常在起病后3～10年内因呼吸衰竭而死亡.新近研究认为ATXN2基因的中间片段(CAG重复数在27-33)与ALS发病风险相关,这可能对研究ALS的发病机制有所帮助,类似研究在中国人群中报道甚少.方法 采集290名ALS患者和345名健康对照的外周血,对其进行DNA的抽提；设计ATXN2的引物,PCR扩增上述研究
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目的 建立一种简便快速高分辨率的珠蛋白肽链反相液相色谱分离技术并探讨其临床应用价值,为同类工作提供一种有参考价值的经验.方法 采用梯度洗脱,菲罗门Jupiter C 18(250×4.6mm,5μm,300A)色谱柱,流动相A为乙腈/甲醇(90：10),流动相B为0.5％三氟乙酸(TFA)水溶液(调节至pH2.6),流速2.0ml/min,柱温40℃,检测波长280nm,50μl全血溶解于1ml去
细胞色素P450 4F2(Cytochrome P450 4F2,CYP4F2)编码的ω-羟化酶将花生四烯酸代谢生成20-HETE.20-HETE对血压调控发挥着极其重要的作用：一方面通过阻断ca2+激活的K+通道引起周身小血管收缩,起促高血压作用；另一方面通过抑制肾脏Na+-K+-ATPase、钠钾氯共转运蛋白(Na+-K+-2C1-cotransporter,isoform 2,NKCC2)及
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目的 近年来流行病学调查资料显示,叶酸缺乏与多种肿瘤发生相关,但缺少后续实验支持且作用机制不清.本实验的目的即为探讨补充叶酸对肝癌发生是否有防护作用及作用的具体分子机制,为临床研究提供扎实的理论与实验基础.方法 构建肝癌小鼠模型,检测叶酸对肝损伤、肝硬化及肝癌的发生发展情况的影响；realtime-PCR、Western Blot、免疫组化检测叶酸对小鼠肝组织及人肝细胞EMT标志分子的作用.CHI
背景与目的 脊髓小脑性共济失调3型(SCA3)是常见的神经遗传病,由其致病基因ATXN3的CAG重复序列异常扩增所致.SCA3有遗传早现现象,在传代过程中,随着CAG重复序列的进一步扩增,当发病年龄早于生育年龄时,则无法婚育传代,理论上突变的ATXN3会逐渐消亡.然而事实并非如此,提示突变的ATXN3存在一定的保存机制,尽管至今未明.本研究拟初步探讨该保存机制.方法 利用位点特异性PCR结合琼脂糖
背景与目的 ATXN3是脊髓小脑性共济失调3型(SCA3)的致病基因,其10号染色体上的CAG重复序列可发生扩增突变从而导致疾病的发生.根据CAG重复数目的不同,CAG重复序列可分为正常片段、中间片段及致病片段.这些片段的重复次数范围界定目前较为混乱.本研究主要对中国人ATXN3的野生型CAG重复分布进行检测并结合相关数据对CAG重复范围进行重新界定.方法 采用基因重组结合PCR的方法制备一种全新
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对个体而言,基因突变即可以由其父母遗传而来,也可以后天获得。前者称为遗传性突变(hereditary mutation),或种系突变(germline mutation),后者称为新生突变(de novo mutation)。研究表明,新生突变可以在人一生中的任何时间点(从受精卵开始)发生。如果新生突变发生在个体发育的早期,将导致一个或多个组织的大量细胞或全部细胞拥有突变的基因型,使个体处于嵌合体