【摘 要】
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[目的]csd基因为蜜蜂性别决定关键基因,但其决定蜜蜂性别的具体分子机理还不清楚.本研究对与蜜蜂csd基因互相作用的因子进行了筛选鉴定及功能分析.[方法]以36小时的蜜蜂受精卵为材料构建酵母双杂交cDNA文库,通过对文库进行筛选获得1个与csd互作的前体mRNA剪切因子pabp2.利用RNAi分析了Pabp2对csd下游基因dsx选择性剪切的影响.利用GST pull-down分析了pabp2与c
【机 构】
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江西农业大学蜜蜂研究所,南昌,330045
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[目的]csd基因为蜜蜂性别决定关键基因,但其决定蜜蜂性别的具体分子机理还不清楚.本研究对与蜜蜂csd基因互相作用的因子进行了筛选鉴定及功能分析.[方法]以36小时的蜜蜂受精卵为材料构建酵母双杂交cDNA文库,通过对文库进行筛选获得1个与csd互作的前体mRNA剪切因子pabp2.利用RNAi分析了Pabp2对csd下游基因dsx选择性剪切的影响.利用GST pull-down分析了pabp2与csd的互作.[结果]通过酵母双杂交筛选到一个与蜜蜂csd互作的基因pabp2.该基因的ORF长为687bp,编码228个氨基酸残基,预测分子量为25.73kD,含有8个外显子、7个内含子,蛋白质结构域分析表明pabp2基因所编码的蛋白具有1个RRM结构域.RT-PCR结果表明该基因在蜜蜂雌雄中均有表达.对pabp2基因进行RNAi之后,csd下游基因dsx在蜜蜂雌性胚胎中的剪切形式变为雄特异性剪切形式,说明干扰pabp2基因后能够影响csd下游基因dsx的性别特异性选择性剪切.[结论]pabp2能够与csd基因互作并能影响csd下游基因dsx的选择性剪切,该基因可能是一个调控蜜蜂雌雄性别发育的前体mRNA剪切因子.
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