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目的：探讨胞浆内受体NOD1对奶牛中性粒细胞(PMN)功能的影响.
方法：分离青年健康奶牛外周血PMN,与NOD1受体特异性抑制剂ML130预孵育2h后,加入100ng/ml脂多糖(LPS)继续孵育4h.采用Western Blot法检测NOD1蛋白的表达变化;采用qPCR 法定量检测促炎细胞因子(IL-1β、IL-8、TNF-α)、趋化因子CXCL2和表面粘附分子(CD11b/CD18、CD62L)的表达;采用Annexin V/PI法检测细胞凋亡;采用流式细胞术检测吞噬和呼吸爆发功能;采用Transwell小室法检测细胞迁移能力.
结果：ML130可显著抑制LPS诱导的NOD1蛋白表达(P＜0.05)及IL-1β、IL-8、TNF-α、CXCL2和CD62L mRNA 表达(P＜0.01),但抑制NOD1对CD11b/CD18的表达无显著影响(P＞0.05);在LPS 刺激下,抑制NOD1导致PMN 吞噬和呼吸爆发功能减弱(P＜0.01)、迁移功能下降(P＜0.01)和凋亡率上升(P＜0.01).
结论：奶牛PMN的免疫功能依赖于NOD1的活性.