论文部分内容阅读
在电离辐射事故发生后,应快速、准确地估算人员所受的剂量,为伤员病情判断、治疗措施的选择、预后诊断和事故分级提供依据.在核事故中,染色体畸变生物学分析仍是检测生物受照剂量常规应用的“金标准”.然而这种方法费时费力,无法满足大批量伤员进行快速剂量估算的要求.因此,在核事故发生后,为了快速、准确地对大量辐射暴露人群进行伤情分类,利用高通量自动化设备进行快速地辐射损伤检测,对于早期诊断和防止器官功能丧失或死亡变得至关重要.代谢组学是对病理/生理刺激或基因改变时生物体系的动态代谢响应的多参数定量分析,它可通过研究电离辐射暴露导致的机体代谢物的变化,对机体受到的辐射损伤进行剂量评估.本研究通过代谢靶标分析和非靶标分析将体液代谢物用于大鼠模型电离辐射损伤早期伤情分类的初步研究.本研究结果可为大规模核事故的伤员分类以及为发展快速、简便、灵敏和准确的电离辐射生物剂量测定方法提供重要的实验依据和理论指导.
目的:本研究通过代谢组学方法,探讨了利用色谱-质谱联用技术和多变量统计分析将体液代谢表型用于急性辐射损伤早期伤情分类研究的可行性。
方法:雄性大鼠接受O、2、4、6和8Gy的单次X线全身照射后,于照后72h内不同时间点腹腔静脉采血和用代谢笼收集尿液。利用液相色谱-串联质谱联用(LC/MS/MS)和气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术,从剂量效应和时间效应两方面考察电离辐射对大鼠体液中代谢物变化的影响。
结果:血浆氨基酸数据表明,辐射后Sh对无辐射(即未照射对照组)的分类正确率为92.3%;辐射后24h,不同程度的伤情分类正确率均在83%以上,其中中度、严重伤情的分类正确率分别达到了91.7%和92.3%;辐射后72h的伤情分类效果最佳,不同程度的伤情分类正确率均达到90%以上,其中中度和极重度的分类正确率达到100%。尿样氨基酸数据表明,辐射后Sh和24h,无辐射(即未照射对照组)的分类正确率均为92.3%,其它不同程度的伤情分类正确率均在60%以上;辐射后48h和72h,无辐射的分类正确率分别为84.6%和76.9%,轻度的分类正确率均为100%,其它不同程度的伤情分类正确率均在70%以上,但尿样整体分类正确率不及血浆样品。将遗传算法(GA)和单变量统计学检验相结合筛选出血浆和尿液中潜在辐射损伤标记物。为了改善辐射损伤早期伤情分类的诊断的正确率,利用气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术进行了辐射后Sh血浆非靶标的代谢组学分析,结合随机森林特征选择和偏最小二乘(PLS)模型进行辐射损伤伤情分类的研究。结果表明,对照组和极重度的分类正确率分别为92.3%,92.9%,其它程度的伤情分类正确率均达到了100%。统计学检验结果(p<0.0003)提示随机森林选择的特征变量与辐射暴露显著相关,可作为潜在的辐射损伤标记物。
结论:体液代谢表型的变化能够反映机体电离辐射损伤的程度,利用代谢组学方法筛选辐射损伤标志物并将其用于辐射损伤早期诊断是可行的。