【摘 要】
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将溶藻弧菌鞭毛蛋白flaC基因定向克隆到真核表达质粒pcDNA3.1(+)中,成功构建真核表达质粒pcDNA-flaC,将该质粒肌肉注射红鳍笛鲷.采用PCR和RT-PCR,检测该真核表达质粒在红
【机 构】
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广东海洋大学水产学院,广东湛江524088
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将溶藻弧菌鞭毛蛋白flaC基因定向克隆到真核表达质粒pcDNA3.1(+)中,成功构建真核表达质粒pcDNA-flaC,将该质粒肌肉注射红鳍笛鲷.采用PCR和RT-PCR,检测该真核表达质粒在红笛鲷组织内的分布、表达.PCR结果显示：免疫接种7d和28 d,注射点周围肌肉、鳃、肾脏、肝脏和脾脏都存在质粒分布；RT-PCR检测结果显示：免疫接种后第7d、14d和第28 d,红鳍笛鲷不同组织内均有目的基因表达.ELISA检测抗体效价结果表明：鱼血清内产生了抗FIaC的抗体,表明DNA疫苗免疫后鱼体表达了目的蛋白,并诱导产生了相应抗体.攻毒实验表明免疫后的红笛鲷能较好地抵抗致病性溶藻弧菌的感染.这一研究表明质粒pcDNA-flaC可能是抵抗溶藻弧菌感染的有效的疫苗候选物.
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