【摘 要】
：
目的 应用脱脂脱蛋白的人骨或β-TCP人工生物材料,构造模拟造血龛的3D培养模型,并观察造血干细胞向巨核细胞分化的过程.方法 1)C57 RFP-BMSCs、GFP-sca-1+小鼠细胞、人骨、β-TCP材料、3cm共聚焦显微镜培养皿和完全培养基构成3D培养系统.培养基中加入100ng/mL的TPO和等浓度的PDGF培养5天.两种细胞直接接种在相同培养皿中(2D)作为对照组.2)3D培养系统(实验
【机 构】
：
南方医科大学南方医院血液科 南方医科大学南方医院创伤骨科
【出 处】
：
广东省医学会第十九次血液病学学术会议
论文部分内容阅读
目的 应用脱脂脱蛋白的人骨或β-TCP人工生物材料,构造模拟造血龛的3D培养模型,并观察造血干细胞向巨核细胞分化的过程.方法 1)C57 RFP-BMSCs、GFP-sca-1+小鼠细胞、人骨、β-TCP材料、3cm共聚焦显微镜培养皿和完全培养基构成3D培养系统.培养基中加入100ng/mL的TPO和等浓度的PDGF培养5天.两种细胞直接接种在相同培养皿中(2D)作为对照组.2)3D培养系统(实验组)和对照组在激光共聚焦显微镜下观察,GFP和RFP的激发波长分别为430nm、559nm.另外,实验组通过自制的半固体脱钙法(SSD,2010 ASH poster, NO.2625)脱钙后,进一步观察GFP和RFP细胞间的相互关系等.结果 GFP-sca-1+细胞和RFP-BMSCs共培养12h后,多数GFP+细胞附着于RFP-BMSCs生长,红、绿荧光以不同的形态学混合在一起.随后,由于PDGF和TPO的刺激作用,围绕在RFP-BMSCs周围的GFP细胞,体积变大并伸出较触角和绒毛.造血发生在临近骨小梁的结构中.SSD法可将坚硬、不透明的骨质成分消失,仅留下GFP和RFP细胞,保持原有的形态、荧光和相互关系.冰冻切片后,很容易鉴定细胞种类、表型及细胞间的相互作用.结论 该新颖的3D培养、观察系统可用于直接、高效地研究骨髓微环境,具有广泛的研究和应用前景.
其他文献
目的 FLT3突变是AML患者预后的独立危险因素,索拉非尼作为多激酶抑制剂临床应用显示对FLT3突变AML有效,本文分析索拉非尼作为难治复发性FLT3突变AML患者挽救性策略在allo-HSCT移植前后应用的地位.方法 16例包括移植前10例难治复发和移植后6例复发FLT3突变AML患者纳入这项回顾性研究；索拉非尼应用方案包括：索拉非尼联合化疗药物诱导缓解和缓解后索拉非尼单药维持治疗.结果 16例
目的 研究西达本胺是否具有靶向杀伤急性髓系白血病(AML)干/祖细胞的潜能及其潜在的分子机制，以期能为AML新的治疗策略提供理论和实验基础。方法 流式细胞术或磁珠分选术分别分选出入AML细胞株KG1α和原代AML细胞中具有LSC特性的CD34+CD38-亚群及原代AML CD34+干/祖细胞亚群，正常造血干细胞来源于造血干细胞移植供者外周血采集的造血干细胞。
背景 研究证实转录因子C/EBPa联合PU.1不但可以将造血系统来源的B/T淋巴细胞,也可以将非造血系统来源的成纤维细胞重编程为有功能的巨噬细胞样的细胞,那么是否也可以将淋巴细胞白血病/淋巴瘤细胞重编程为有功能的巨噬细胞或将其恶性程度降低以提高化疗敏感性.方法 构建表达C/EBPa、PU.1和共表达2个转录因子的慢病毒载体,eGFP为报告基因,建立稳定过表达上述转录因子的Jurkat细胞株,定期流
目的 获得一种合成方法简单、不影响砷剂抗肿瘤细胞活性及具有良好生物相容性的砷标记物,为进一步研究砷剂在白血病细胞内药动学提供技术手段.方法 运用化学合成原理和方法,将阿散酸(APAV)其氨基端与异硫氰酸荧光素(FITC)进行偶联.应用流式细胞术和荧光显微镜观察APAV-FITC诱导肿瘤细胞的凋亡活性.结果 APAV与FITC偶联成功,标记率(产率)为53.6％.APAV-FITC可以诱导K562细
目的 比较研究cdx2基因与WT1基因在儿童急性淋巴白血病中的表达及临床意义.方法 采取160例初发ALL患儿骨髓,运用RT-PCR方法检测cdx2基因与WT1基因在B-ALL,T-ALL及正常对照组中的表达情况,并运用半定量法比较分析两种基因的相对表达水平以及与疗效的关系.结果 160例ALL患者中CDX2阳性130例(81.3％),WT1阳性81例(50.6％).正常对照者两种基因的表达均为阴
目的 比较MAC与Bu/Cy2作为中危急性髓细胞白血病预处理方案的近期、远期疗效.方法 收集本院2007-2014年行自体造血干细胞移植的中危77例急性髓细胞白血病患者的病历资料,其中39例动员成功患者行自体外周血造血干细胞移植(Auto-PBSCT),予以Bu/Cy2方案预处理(Bu/Cy2组),38例动员失败患者行自体骨髓移植(Auto-BMT),予以MAC方案预处理(MAC组),分析MAC组
目的 探讨索拉非尼(Sorafenib)联合阿糖胞苷(cytarabine)治疗FLT3-ITD阳性难治性、复发性急性髓系白血病的安全性和有效性.方法 应用索拉非尼联合阿糖胞苷(索拉非尼400mg一日两次口服d1-d28；阿糖胞苷25-50mg皮下注射d1-14).治疗2013年6月至2015年4月7例FLT3-ITD阳性的难治性复发性急性髓系白血病(其中男性5例,女性2例,年龄20-57岁,中位
目的 流式细胞仪(FCM)的免疫表型分析是否能改善对淋巴瘤相关的噬血细胞综合征(LASH)的病因诊断。方法 本研究对比分析了54例噬血细胞综合征(HLH)患者同期的FCM对骨髓有核细胞的免疫表型分析及病理组织活检和免疫组化结果。结果 36例患者经临床和组织病理最终确诊为LASH,其中大B细胞淋巴瘤8例,套细胞淋巴瘤2例,复合性淋巴瘤1例,FCM均检测到轻链限制性的异常FSC的B细胞；诊断符合率为1
目的 肾功能损害是多发性骨髓瘤(multiplemyeloma,MM)患者最常见的并发症和主要的死亡原因之一,现总结我院MM伴肾功能损害患者传统药物治疗与新药治疗情况,以提高对本病药物治疗认识.方法 回顾性分析我院2002年9月1日至2011年9月30日多发性骨髓瘤伴肾功能损害住院患者36例,将其分为新药治疗组及传统药物治疗组,进行两组间临床资料的比较.结果 36例患者中,分型以轻链型最多见,占3
研究目的 基于β2M和白蛋白(ALB)的国际分期系统经常被用于评估多发性骨髓瘤患者的预后.但是其在弥漫大B细胞淋巴瘤患者中的预后意义,尤其是以美罗华联合CHOP为主的治疗方案中意义仍不明确.方法 回顾性地分析了215例采用RCHOP方案治疗的原发弥漫大B细胞淋巴瘤患者病例资料.根据ISS分期系统,将所有患者分为三期(Ⅰ期β2M＜3.5mg/L,ALB≤3.5g/dl,Ⅱ期介于Ⅰ期和Ⅲ期之间,Ⅲ期β