【摘 要】
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猪链球菌(Streptococcus suis,SS)是引起猪链球菌病的主要病原,有35个血清型,以猪链球菌2型(SS2)在流行最广.SS2因其可感染不同年龄段猪发病而严重威胁着养猪业的发展,并且可以感染人.猪链球菌疫苗仍是防控该病的主要手段.随着猪链球菌感染生物学研究的深入,越来越多的毒力因子与免疫原性相关因子被逐渐发现.这些因子大多为细菌分泌或表面锚定蛋白.本实验室前期蛋白质组学研究中鉴定发现
【机 构】
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浙江大学动物预防医学研究所/浙江省动物预防医学重点实验室,杭州,310007
【出 处】
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2016第六届中国兽药大会(中国畜牧兽医学会动物药品学分会第五届全国会员代表大会暨2016学术年会、中国微生物学会兽医微
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猪链球菌(Streptococcus suis,SS)是引起猪链球菌病的主要病原,有35个血清型,以猪链球菌2型(SS2)在流行最广.SS2因其可感染不同年龄段猪发病而严重威胁着养猪业的发展,并且可以感染人.猪链球菌疫苗仍是防控该病的主要手段.随着猪链球菌感染生物学研究的深入,越来越多的毒力因子与免疫原性相关因子被逐渐发现.这些因子大多为细菌分泌或表面锚定蛋白.本实验室前期蛋白质组学研究中鉴定发现了一种猪链球菌保守折叠酶脂蛋白PrsA(peptidyl-prolyl isomerase).BlastP与PCR鉴定结果显示PrsA基因在猪链球菌中保守存在。构建原核表达载体、IPTG诱导表达与镍柱纯化后获得了PrsA蛋白，通过免疫印迹与ELISA试验发现该蛋白与猪链球菌感染动物康复血清反应性较强，且PrsA蛋白在细菌表面、菌体内和培养上清中均有分布。去LPS的纯化PrsA蛋白作用于猪肺泡巨噬细胞和小鼠巨噬细胞，细胞出现死亡，这种死亡并非因穿孔作用引起，也与其酶学活性无关。电镜观察发现主要是细胞空泡化，细胞膜完整性被破坏，细胞器肿大，但细胞核变化不明显。PrsA蛋白处理可诱导IL-ip、IL-6、TNF-a等细胞因子表达上调和分泌，研究初步结论是PrsA可以诱导细胞焦亡，其作用机制有待深入探索。以小鼠为模型，PrsA免疫两次之后小鼠血清效价达10万倍以上，免疫原性良好。分别以2型强毒株HA9801(SS2)与9型强毒株JX13 (SS9)进行攻毒保护试验，结果显示PrsA蛋白免疫组小鼠可抵抗SS2或SS9感染，保护力达到60％-80%之间，而未免疫组小鼠感染SS2或SS9后几乎全部死亡（死亡率达90%-100%）。表明猪链球菌PrsA蛋白可诱导机体产生特异性抗体，具有良好的交叉保护能力，可能是一种新型亚单位苗候选抗原。
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