【摘 要】
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H5亚型流感病毒HA上糖基化位点根据其位置不同起着不同的作用.其中HA蛋白茎部的糖基化位点相对保守,在维持HA蛋白三聚体的稳定性发挥主要作用.本实验室前期研究表明:茎部第10
【机 构】
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扬州大学兽医学院江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心,江苏扬州225009
【出 处】
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中国畜牧兽医学会生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十二次学术研讨会
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H5亚型流感病毒HA上糖基化位点根据其位置不同起着不同的作用.其中HA蛋白茎部的糖基化位点相对保守,在维持HA蛋白三聚体的稳定性发挥主要作用.本实验室前期研究表明:茎部第10/11位重叠糖基化位点可能对HA蛋白裂解产生影响,但不能确定哪一位点起着关键作用.本试验时H5N1亚型禽流感病毒(AIV)SY株为母本,通过定点突变和反向遗传技术构建了3种HA蛋白茎部糖基化位点缺失的重组病毒(rSY-△10、rSY-△11、rSY-△10/11),并对其生物学特性和致病性进行了测定.结果表明:SY株H5N1茎部第10位和第11位都可以形成糖基化位点.相较于野生型病毒来说,这三种重组病毒都表现出对热及低pH的不稳定性.但是在病毒传代过程中,rSY-△11和rSY-△10/11极易发生回复现象.rSY-△11和rSY-△10/11在CEF细胞上的增殖速率显著低于rSY-△10和野生型病毒(rSY).同时,Western blot检测发现rSY-△11和rSY-△10/11的HAO蛋白裂解时间较rSY-△10和rSY有明显的延迟.小鼠致病性试验显示,rSY-△11和rSY-△10/11的毒力显著低于rSY-△10和rSY.因此,H5N1亚型AIV SY株茎部第11位糖基化位点对于病毒HA蛋白裂解至关重要并可影响其毒力.
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