目的对经API细菌鉴定条所证实的眼源性蜡样芽胞杆菌进行HBL基因鉴定并进行体外毒理性试验。方法根据溶血素结合亚基B、2个溶血亚基L1、L2三种组份的基因核苷酸序列,设计和合成3对特异性引物,通过体系和条件优化,建立PCR检测方法,并对5株临床分离的蜡样芽胞杆菌样本进行检测分析;随机选取其中1株菌,利用盐析法提取溶血素,配成不同浓度且具有活性的HBL作用于绵羊红细胞、Vero细胞和Hela细胞监测其对细胞的毒性;通过腹腔注射观察HBL对小鼠的致死作用,评估其毒力的强弱。结果 5株临床分离菌中,全部检出三个基因;蜡样芽孢杆菌溶血素BL蛋白具有较强溶血活性,其溶血活呈明显的时间-剂量依赖性;溶血素BL对Vero细胞和Hela细胞的作用所致的形态变化虽有不同,但结果均会导致细胞死亡,其内容物释出;对小鼠的致死率同样存在时间-剂量依赖性,且2.0 HU/ml浓度以上的溶血素BL可使小鼠48h的致死率达100%(5/5)。结论蜡样芽胞杆菌溶血素具有较强的溶血活性,较低浓度即可导致细胞及小鼠死亡BL。对临床分离的眼源性蜡样芽胞杆菌BL基因进行检测,三个片段均存在,为感染该菌后病情发展迅速、预后较差的实际提供了理论依据,同时为该病快速诊断和分子流行病学调查提供了新的方法。