【摘 要】
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目的：运用比较蛋白质组学的理论方法,探讨重复运动后大鼠骨骼肌蛋白质组差异性表达的动态变化及其规律,筛选出运动应激条件下对骨骼肌损伤重塑有意义的骨骼肌目标蛋白质,希望能为了解重复运动骨骼肌变化的机制,为深入研究运动损伤推荐和普遍采用的运动强度与形式提供依据.方法：以84只雄性Wista大鼠为研究对象,按照运动方式分为14组(备用组1组、对照组1组和实验组12组,每组n=6).大鼠饲养2周后,体重18
【机 构】
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山东体育学院研究生部,山东济南250102
【出 处】
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2012年中国运动生理生化学术会议
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目的：运用比较蛋白质组学的理论方法,探讨重复运动后大鼠骨骼肌蛋白质组差异性表达的动态变化及其规律,筛选出运动应激条件下对骨骼肌损伤重塑有意义的骨骼肌目标蛋白质,希望能为了解重复运动骨骼肌变化的机制,为深入研究运动损伤推荐和普遍采用的运动强度与形式提供依据.方法：以84只雄性Wista大鼠为研究对象,按照运动方式分为14组(备用组1组、对照组1组和实验组12组,每组n=6).大鼠饲养2周后,体重185±5克对照组、备用组：不进行任何形式的运动,与其他实验组饲养方法相同.运动组大鼠在实验前3天,每天都进行一次10m/s持续十分钟的跑台适应训练.急性运动后即刻组(A1)：大鼠在动物跑台上进行下坡跑,速度10m/min,坡度为-16°,30min后速度加至20m/min运动至结束,总运动时间为120min.运动结束后即刻取材.急性运动后组(A24-168h)：按照急性运动后即刻组的运动方案进行运动,运动后24h、72h、168h取材.训练后即刻组(B0)：按照急性运动后即刻组的运动方案进行运动,连续运动7天,每天1次.在末次训练后即刻取材.训练后组(B24-168h)：按照急性运动后即刻组的运动方案进行运动,一周后再进行重复运动,运动后24h、72h、168h取材.提取右腿骨骼肌的全蛋白,对样品蛋白进行双向凝胶电泳技术分离、后固定进行染色.运用BioPDquest图像分析软件对双向凝胶电泳图谱进行分析,选取运动后差异表达量大于10倍的蛋白点,用串联飞行时间的质谱蛋白质仪(ULGRAFL-FLEX-TOF/TOF)进行质谱鉴定.结果：运动后24h、72h、168h重复运动后,经过双向电泳获得清晰的图谱,用软件分析共获得重复运动组与对照组相比269个2倍量以上差异点,52个10倍以上差异点,其中24h10个(上调3个,下调7个),72h 29个(上调8个,下调21个),168h29个(上调7个,下调22个).其中质谱分析并鉴定了5个表达差异蛋白点,包括Ela1丙酮酸脱氢酶,在运动24h为消失,72h后下调,运动SBP1 24h周后量明显上升,72h及168h无明显变化,在运动24h后SPA1上调,重复运动24h后SCAF1下调和一个116kDa分子量的未知蛋白.结论：在整个重复运动过程中,168h后,大鼠骨骼肌蛋白质组在24h、72h运动后发生了显著性差异表达,168h后继续运动蛋白质组出现适应性变化.蛋白质的变化表明,采用重复运动骨骼肌损伤运动模型,可使骨骼肌能量代谢水平提高、骨骼肌应激反应与适应能力增强、重复运动大鼠骨骼肌出现良好的适应性变化.
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