论文部分内容阅读
目的 通过观察窒息新生大鼠缺氧缺血心肌损伤模型经mitoKATP通道开放剂二氮嗪干预后心肌线粒体膜通透性转换孔(mitochondrial permeable transition pore,MPTP)开放度的变化,探讨mitoKATP通道开放剂对线粒体保护作用机制.方法 新生SD大鼠随机分为对照组、窒息组、二氮嗪组、格列苯脲组、溶剂组,每组各10只,各组均于成年母鼠怀孕第21天行剖宫产取出新生鼠；对照组不夹闭子宫动脉；窒息组以夹闭孕鼠子宫动脉方法制作宫内窒息模型,剖宫产后不予任何干预；二氮嗪组在制作窒息模型后腹腔注射mitoKATP通道开放剂二氮嗪3mg/kg；格列苯脲组在制作窒息模型后腹腔注射二氮嗪3mg/kg及mitoKATP通道抑制剂格列苯脲300μg/kg,溶剂组在制作窒息模型后腹腔注射药物溶剂0.1 mMNaOH0.5ml.于出生24h处死新生鼠,以酶联免疫吸附试验方法(ELISA)检测血清心肌肌钙蛋白(cTn)I,以免疫组化染色方法检测心肌组织凋亡诱导因子(AIF)表达量,以钙黄绿素-AM与氯化钴荧光染色方法检测MPTP开放度.结果 对照组、窒息组、二氮嗪组、格列苯脲组、溶剂组血清cTnI分别为0.07±0.02、0.40±0.29、0.07±0.04、0.26±0.21、0.34±0.20(U/L)(P＜0.01),窒息组明显升高,二氮嗪干预后下降,格列苯脲组、溶剂组与窒息组相近；对照组、窒息组、二氮嗪组、格列苯脲组、溶剂组心肌组织AIF阳性细胞比例分别为：5.17±0.06、81.12±10.77、44.53±11.30、79.89±11.46、88.01±13.38(％)(P＜0.01),窒息组较正常组明显升高,二氮嗪组表达下降,但未达正常,格列苯脲组、溶剂组与窒息组相近；对照组、窒息组、二氮嗪组、格列苯脲组、溶剂组MPTP分别为79.40±10.57、118.10±19.10、96.40±14.61、113.5±11.21、126.20±3.79(P＜0.01).窒息组心肌线粒体MPTP开放增加,二氮嗪干预后MPTP开放度降低,格列苯脲组以及溶剂组结果均与窒息组相近.结论 二氮嗪可能通过抑制心肌MPTP开放、减少AIF释放以减轻窒息后缺氧缺血性心肌损伤.