目的：建立HPLC-MS/MS法同时测定人血浆及中烟酸及其活性代谢物烟酰胺、烟脲酸浓度方法。方法：采用Genimi C18柱(50×3．00mm，3μm)，流动相为醋酸水溶液-甲醇(98：2)，流速为0．2 ml·min-1，样品用乙腈沉淀蛋白后进样，质谱以MRM模式测定，6-甲基烟酸作内标，按内标法定量。结果：烟酸、烟酰胺、烟脲酸和内标的保留时间分别为2．2min、2．9min、5．7min和2．4min，烟酸质谱检测标准曲线在0．3125～640．0μg·L-1范围内有良好线性，最低定量限为0．3125μg·L-1，日内RSD小于5．0％，日间RSD小于7．5％，方法同收率96％～106％，预处理回收率64．1％～75．9％;。结论：本法具有快速简便，灵敏准确等特点，适用于血浆中烟酸及其活性代谢物浓度测定及药代动力学、生物利用度研究用。