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目的:对甲硝唑浓度反相高效液相色谱法进行改进。方法:采用PhenomenexC18分析拄(150 mm×4.6 mm,5μm)、,流动相为甲醇-水(25:75),流速为1 mL/min,柱温为40℃,替硝唑作内标。血浆样品经pH9.5的硼酸盐碱化后用3mL二氯甲烷-乙酸乙酯(1:1)提取浓集,在320nm波长处检测,按内标法定量。结果:甲硝唑和替硝唑的保留时间分别是4.0min和4.8min。甲硝唑在0.0125~20μg/mL范围内线性关系良好(r=0.9992);最低定量限为0.0125μg/mL;批内、批间RSD分别为2.63%~5.83%和4.52%~6.88%;方法回收率为95.67%~108.21%;萃取回收率为70.25%~77.76%。结论:本法具有快速简便、灵敏准确等优点,适用于甲硝唑肠溶片人体药动学研究。