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目的:观察循环OCN+成骨细胞、IGF-I、IGFBP-3在正颌手术前后的动态变化,以期了解血清IGF-I动员循环OCN+成骨细胞促进骨折修复的作用.方法:人外周血循环OCN+成骨细胞的分离与鉴定:健康成年人9例.男性5例,女性4例,平均年龄(26.3±1.7)岁,分别取外周静脉血5ml.分离外周血单核细胞,流式细胞仪检测循环OCN+成骨细胞的比例.另从1例健康志愿者获得外周静脉血80 ml,用于流式细胞仪分选出OCN+成骨细胞.提取循环OCN+骨细胞的总RNA,RT-PCR检测ALP、OCN、COL-1的表达.(1)正颌手术前后循环OCN+成骨细胞的改变:正颌手术患者10例.男性4例,女性6例,平均年龄21.1±0.9岁.每个患者于术前、术后1周(术后第6~7天)、术后2周(术后13~15天)、术后4周(术后第27~29天)分别收集外周血5ml.分离外周血单核细胞,部分用FACs检测OCN+细胞,部分用于IHC检测.(2)正颌手术前后外周血IGF-I、IGFBP-3的改变:用上述收集的正颌手术患者外周血1ml,离心分装血清,采用ELISA方法检测血清中IGF-I、IGFBP-3的表达.结果:(1)健康成年人循环OCN+成骨细胞占单核细胞比例为(3.32±0.86)%.循环OCN+成骨细胞比例与年龄呈负相关(R=-0.691,P=0.039).RT-PCR产物电泳结果显示,循环OCN+成骨细胞中ALP、OCN、COL-1均呈阳性表达,电泳条带分别位于434、159、339 bp.(2)流式细胞术检测结果表明,术后循环OCN+成骨细胞比例均显著高于术前(P<0.05),术后1周和2周显著高于术后4周(P<0.05),术后1周与术后2周无显著性差异(P>0.05).术后循环OCN+成骨细胞比例呈现先升高后下降的趋势,但至术后4周时仍高于术前.(3)IHC检测发现循环OCN+成骨细胞呈膜阳性表达,染色特异性较高,未见明显非特异性染色.术后循环OCN+成骨细胞比例明显高于术前,与流式细胞术检测结果一致.(4)血清IGF-I的表达:术前显著高于术后1周(P=0.003),但其余各时间点的IGF-I表达均无显著性差异(P>0.05).(5)血清IGFBP-3的表达:术前显著高于术后1周(P=0.037),术后1周与术后4周间有显著差异(P=0.010),其余各时间点间的IGFBP-3表达均无显著性差异(P> 0.05).术后1周时下降最明显,术后2周和术后4周缓慢上升,但仍低于术前.(6)血清IGF-I与IGFBP-3的相关性分析:IGFI与IGFBP-3总体有显著相关(P=0.007),但各时间点间无相关性(P>0.05).(7)循环OCN+成骨细胞与血清IGF-I的相关性分析:循环OCN+成骨细胞与IGF-I总体无显著相关(P=0.536),两者各时间点间也无明显相关(P>0.05).结论:(1)循环OCN+成骨细胞能表达骨相关基因,如I-型胶原酶、骨碱性磷酸酶及骨钙素,提示该细胞具有成骨潜能.(2)循环OCN+成骨细胞在正颌术后数量上升,提示骨折早期动员了循环OCN+骨细胞参与骨组织修复.(3)正颌术后骨损伤愈合的早期,循环OCN+成骨细胞与IGF-I无显著相关.