【摘 要】
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利用木质纤维素的生物转化生产生物燃料和生物基化学品是目前国内外研究的热点,但纤维素酶的生产成本过高是限制工业化生产的主要瓶颈之一.纤维素酶是一种诱导酶,目前常
【机 构】
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大连理工大学生命科学与技术学院 大连116023
【出 处】
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中国生物工程学会第六次全国会员代表大会暨第九届学术年会
论文部分内容阅读
利用木质纤维素的生物转化生产生物燃料和生物基化学品是目前国内外研究的热点,但纤维素酶的生产成本过高是限制工业化生产的主要瓶颈之一.纤维素酶是一种诱导酶,目前常用的诱导物主要是乳糖及纤维素类物质,如纯纤维素、预处理后的秸秆等,其主要来源是含有β-1,4糖苷键的植物细胞壁.燕麦葡聚糖含有β-1,3糖苷键,但目前还没有利用其作为纤维素酶诱导物的研究.本文以里氏木霉Rut-C30为出发菌株,以燕麦葡聚糖作为诱导物,研究纤维素酶的诱导生产,并与乳糖(β-1,4糖苷键)进行了比较.实验结果表明,当添加10 g/L燕麦葡聚糖作为碳源时,在发酵的48 h滤纸酶活最高可达到1.63 IU/mL,蛋白分泌量为0.39 g/L,生物量达到6.22 g/L,而相同浓度乳糖的滤纸酶活在60 h才能达到1.58 IU/mL,比燕麦葡聚糖晚12 h.同时发现,燕麦葡聚糖诱导的木聚糖酶活性非常高,24 h即可达到58.83 IU/mL,48 h最高为68.02 IU/mL,是乳糖诱导水平最高值的1.58倍.通过实时定量PCR(qRT-PCR)检测关键酶基因cbh1、eg1、bgl1、xyn1的转录水平,结果表明,以燕麦葡聚糖为诱导物时,其cbh1、eg1及xyn1的转录水平均高于乳糖的结果.在24 h时,燕麦葡聚糖诱导的xyn1表达量为乳糖的4.56倍;而在36 h时,只有bgl1的表达量低于乳糖,cbh1、eg1的表达量分别是乳糖的1.63及2.01倍.以上研究结果表明,含有β-1,3糖苷键的燕麦葡聚糖可诱导里氏木霉产纤维素酶,且其诱导产纤维素酶滤纸酶活的效果好于乳糖.本研究为进一步开发新型的纤维素酶高效诱导物提供了研究基础.
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