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目的:建立猪内源性反转录病毒(PERV)在基因组中整合拷贝数的检测方法。
方法:设计一对特异性引物,采用基于SYBR Green Ⅰ的实时荧光定量PCR方法,检测小型猪基因组DNA中多聚酶基因(pol)的拷贝数,估算出单细胞基因组中PERV整合的拷贝数,从而建立起PERV整合拷贝数的检测方法,并对该方法进行特异性、敏感性、重复性分析。
结果:该检测方法特异性较高,敏感性较普通PCR方法高100倍。
结论:建立了基于SYBR Green Ⅰ的PERV拷贝数的定量PCR检测方法,可用于实验用猪的病原安全性评价,也可用于异种移植后PERV存在与表达状况的监测。