G6PD参与苯醌对K562细胞的毒性效应研究

来源 :第十一届全国环境与职业医学研究生学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:fulva
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  [目的]研究葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)参与1,4-苯醌(1,4-benzoquinone,BQ)对人白血病细胞(K562)的毒性效应.[方法]用不同浓度的苯醌(0、10、20、40、60 μmol/L)处理K562细胞24、48、72 h后,应用噻唑蓝(MTT)比色法检测苯醌对K562细胞的增殖作用;苯醌处理K562细胞4、8、12 h后,用荧光探针法检测细胞内活性氧(ROS)含量;苯醌(0、10、20、40 μmol/L)处理K562细胞48 h后用Western blot法检测G6PD蛋白表达的变化;苯醌处理K562细胞12h后比色法检测细胞中总谷胱甘肽和氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量. [结果]与对照组相比,在同一时间点,随着苯醌浓度的增加,细胞相对增殖率显著下降(P<0.05),当苯醌浓度>20 μmol/L时,细胞相对增殖率亦随着染毒时间的延长而降低;苯醌染毒4h后,细胞内ROS水平随着苯醌浓度的增加而升高,苯醌浓度为60 μmol/L时较对照组有统计学意义(P<0.05);Western blot结果显示低剂量下(苯醌浓度<40 μmol/L时)随着苯醌浓度的增加,G6PD蛋白含量亦增加,当苯醌浓度升至40 μmol/L时,G6PD含量有所下降,但仍高于对照组;当苯醌浓度较低时,细胞中总谷胱甘肽含量及GSSG较对照组均显著增高(P<0.05),而随着染毒剂量的增加,总谷胱甘肽及GSSG含量较对照组均显著下降(P<0.05). [结论] K562细胞在暴露于苯醌后,ROS水平增加,可能激活G6PD相关抗氧化系统,产生较多的还原性谷胱甘肽,以减少苯醌对细胞的氧化损伤.
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