缺血预处理对胆管缺血再灌注损伤的保护作用

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目的观察缺血预处理对胆管缺血再灌注损伤的保护作用。方法Sprague-Dawley(SD)大鼠共24只,分为3个组,假手术组(sham operation group, SO)、缺血再灌注组(ischemic-reperfusion group, IR)、缺血预处理组(ischemic-preconditioning group, IP),每组8只。IR大鼠的处理:腹腔麻醉,无菌条件下取正中切口剖腹,游离肝周韧带,切断肝周韧带内的肝脏侧支血管,无损伤血管夹阻断第一肝门20分钟,复流1小时。IP大鼠在IR大鼠处理的基础上,在正式阻断第一肝门前,预先阻断第一肝门5分钟,复流5分钟,其余同IR组。SO大鼠:腹腔麻醉,无菌条件下取正中切口剖腹,不游离肝周韧带,不阻断第一肝门,实验时间同IP组。实验结束后分别收集胆管中的胆汁、下腔静脉血及肝外胆管标本,处死动物。分别在电镜下对胆管组织细胞和线粒体进行病理组织学观察,在室温下以黄嘌呤氧化酶法测定胆管组织中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)活性水平,用Olympus Au2700全自动生化仪检测胆汁中r-谷氨酰转肽酶(glutamyl transpeptidase, r-GT )含量,血中丙氨酸转氨酶(alanine transaminase ,ALT)、天冬氨酸转氨酶(aspartate transaminase ,AST)水平。结果电镜下SO组胆管上皮细胞表面绒毛丰富,排列整齐,细胞核大小正常,胞质内线粒体丰富,分布较均匀,大小正常,基质均匀,双层膜结构清晰,嵴清晰可见,。IR组胆道上皮细胞水肿明显,表面微绒毛较稀疏,线粒体明显肿胀,嵴断裂、消失,基质呈高度毛玻璃状。与IR组比较,IP组胆管上皮细胞肿胀较轻,表面绒毛减少,胞质较疏松,线粒体轻度肿胀,线粒体部分基质脱失,有的嵴较模糊。组织病理形态学观察表明,与SO组比较,IP组和IR组的胆管组织均出现损伤, IP组的损伤明显较IR组轻。胆管组织中SOD(u/mgprot)水平,SO组为181.19±11.73,IR组为161.71±10.34,IP组为175.23±6.48。统计学处理,IR组与SO组、IP组均数差异有显著性意义(P﹤0.05),IP组与SO组比较,均数差异无显著性意义(P﹥0.05)。胆汁中r-GT浓度(Iu/L)水平,SO组为11.32±7.25 ,IR组为32.05±14.96,IP组为17.63±7.26,IR组与SO组、IP组均数差异有显著性意义(P﹤0.05),IP组与SO组比较,均数差异无显著性意义(P﹥0.05)。血中ALT(u/L)和AST(u/L)水平,SO组ALT97.50±47.02、AST 239.65±91.72,IR组ALT 240.00±102.95、AST 558.31±236.01;IP组为145.38±65.32、372.70±152.59。IR组与SO组、IP组比较,ALT均数差异有显著性意义(P﹤0.05),IP组与SO组比较,ALT均数差异无显著性意义(P﹥0.05);IR组与SO组比较,AST均数差异有显著性意义(P﹤0.05),IR组与IP组比较,AST均数差异无显著性意义(P﹥0.05)。结论5分钟缺血预处理对大鼠胆管缺血再灌注损伤具有保护作用。
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