河蚬多肽与姜黄素对酒精性肝损伤保护作用的研究及其护肝固体饮料的研制

来源 :华南理工大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:anjialaogong
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酒精性肝损伤,亦或称酒精相关肝病(ALD),是由于过量饮酒所致的肝脏疾病。近年来,我国免疫计划的开展使得乙肝感染的人数大幅降低,但由于不良饮酒习惯,我国罹患ALD的人数正在逐年递增,ALD成为我国临床最常见的肝病之一。酒精影响肝脏对脂肪酸的分解,造成体内脂肪酸堆积,久而久之便形成酒精性脂肪肝,进而恶化为肝炎、肝硬化等,酒精性脂肪肝是酒精性肝病最早出现的症状,预防和保护酒精性脂肪肝对预防和保护ALD具有极其重要的意义。ALD治疗的原则包括戒酒和营养支持,本论文从营养支持的角度发出,结合已发现的具有良好护肝功效但生物利用率较低的姜黄素以及河蚬酶解蛋白肽,探究两者共同作用下对酒精性肝损伤的保护作用,并研制出一款安全有效的护肝固体饮料。首先探究了河蚬多肽与姜黄素对急性酒精性肝损伤的保护作用。借助C57BL/6小鼠验证急性酒精性肝损伤动物模型,并采用此模型通过体内实验方法来验证河蚬多肽与姜黄素的护肝功效,实验结果显示姜黄素对ALD具有一定的保护作用,肝脏组织细胞中空泡化程度降低。与酒精模型组相比,姜黄素实验组的血清中的AST、ALT酶活力以及TG、TC的含量分别降低19.72%、10.59%、8.44%、29.12%,姜黄素-河蚬多肽实验组的血清中的AST、ALT酶活力以及TG、TC的含量分别降低31.30%、25.65%、22.35%、42.23%,而且姜黄素实验组的肝匀浆中的AST、ALT酶活力以及TG、TC的含量分别降低10.96%、23.84%、29.47%、10.00%,姜黄素-河蚬多肽实验组的肝匀浆中的AST、ALT酶活力以及TG、TC的含量分别降低19.72%、30.30%、41.91%、65.00%,即在河蚬多肽存在的情况下,护肝功效更加显著。借助紫外-可见光谱法和荧光光谱法来探究河蚬多肽与姜黄素之间是否存在相互作用,实验结果显示,当温度在25-60°C之间时,两者之间可发生静态荧光猝灭,产生新的物质,且猝灭常数受温度的影响。接着借助SD大鼠非外翻肠囊模型来探究河蚬多肽对姜黄素的肠道吸收率的影响,结果发现在河蚬多肽的存在下,姜黄素的肠道吸收率可得到提升,其中单位面积的十二指肠、空肠、回肠中吸收姜黄素的增加量分别为0.57%、0.35%、5.86%,即主要增加了姜黄素在回肠部位的吸收。此外,相较于姜黄素实验组,姜黄素-河蚬多肽实验组中的姜黄素在十二指肠、空肠、回肠的表观渗透率的增加量分别为13.61%、40.48%、7.76%。姜黄素在回肠的表观渗透率分别是十二指肠的11.30倍和10.03倍,实验结果表明姜黄素的在肠道中的主要吸收场所是回肠部位。以河蚬酶解蛋白肽和姜黄素为功效成分,研制一款具有良好护肝效用的固体饮料。通过感官评价实验以及加速保藏实验,最后筛选出两种产品配方,护肝固体饮料A的成分为:河蚬酶解蛋白肽与姜黄素按照质量比2:1混合,添加质量分数0.6%的桔子粉、3%的果胶以及1.2%的二氧化硅。肝固体饮料B的成分为:河蚬酶解蛋白肽与姜黄素按照质量比2:1混合,添加0.6%的桔子粉、3%的果胶以及1.5%的纳米级二氧化硅。借助LO2细胞构建酒精性肝损伤模型进行相关机制研究,结合前期的酒精性肝损伤动物模型,分别通过体外细胞实验和体内动物实验来验证两种护肝粉固体饮料的护肝活性。实验结果显示,相较于酒精模型组,在护肝固体饮料A的作用下,LO2细胞分泌的ALT和AST分别降低了56.62%和21.70%,在护肝固体饮料B的作用下,LO2细胞分泌的ALT和AST分别降低了57.13%和35.00%。此外,护肝固体饮料A干预下的动物血清中ALT和AST酶活力分别降低33.52%、36.77%,护肝固体饮料B干预下的动物血清中ALT和AST酶活力分别降低36.27%、11.06%。即护肝固体饮料A和护肝固体饮料B两个实验组的AST酶活力和ALT酶活力均呈显著性下降,实验结果表明两种护肝粉剂对酒精性肝损伤均具有保护作用。
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