【摘 要】
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多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)是产生单克隆免疫球蛋白的浆细胞恶性增生性血液肿瘤,有多种遗传改变,尽管已经明确了一些在疾病之初或疾病的进程中起重要作用的分子事件(
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多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)是产生单克隆免疫球蛋白的浆细胞恶性增生性血液肿瘤,有多种遗传改变,尽管已经明确了一些在疾病之初或疾病的进程中起重要作用的分子事件(如14q34易位)或者涉及的一些异常(如13号染色体缺失),但其病因及发病机理仍然未明.为了寻找多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)新的相关基因,应用cDNA芯片对初诊MM患者和正常对照人的骨髓单个核细胞的mRNA进行检测,结果显示DAZAP2(deleted inazoospermia associated protein 2)在患者中表达下调最明显;进而制备了DAZAP2多克隆抗体,从蛋白水平上检测DAZAP2在患者中的表达,结果与芯片及RT-PCR一致,在多数患者中DAZAP2表达明显下调或不表达.DAZAP2为新的MM负性相关基因.由于DAZAP2功能未明,因此我们克隆了该基因,运用生物信息学和分子生物学实验相结合的方法,试图探讨其功能及与多发性骨髓瘤发生的关系.该实验利用cDNA芯片技术建立了多发性骨髓瘤患者基因表达谱,获得差异表达基因566条,并进一步从mRNA及蛋白水平上检测出DAZAP2在60％左右初诊多发性骨髓瘤患者中表达下调,DAZAP2为MM候选抑瘤基因之一.DAZAP2在人类正常组织中广泛表达,转录本大小一致.其蛋白产物主要位于细胞质中,与鼠的Prtb高度相似.通过基因的结构和分子种系发生分析,该基因起源早,进化缓慢,C端结构比N端更加保守,可能两端具有不同的功能,并且具有多个SH2,SH3接合结构,通过参与某些信号传导途径来调节骨髓瘤细胞的增殖与分化.下一步将利用抗DAZAP2多克隆抗体及制备单抗来进一步扩大临床样本的检测,为临床诊断MM建立新的辅助手段.同时还可利用酵母双杂交技术,筛选骨髓cDNA文库,以获得与DAZAP2相互作用的浆细胞特有蛋白,有助于进一步阐明其在多发性骨髓瘤的发生发展中所起的作用.
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