目的:明确香烟烟雾提取物是否经内质网应激CHOP信号通路促进人肺动脉内皮细胞凋亡,以及苯基丁酸（PBA）是否具有凋亡抑制作用。方法:通过慢病毒转染重组RNA沉默HPAEC人肺动脉内皮细胞CHOP基因表达,将未进行CHOP基因干预的HPAEC人肺动脉内皮细胞及CHOP基因沉默的HPAEC^-CHOP人肺动脉内皮细胞各自分为对照组（Ctrl组,常规培养不作特殊处理）、香烟烟雾提取物组（CSE组,培养基中加入10%香烟烟雾提取物）、苯基丁酸组（PBA组,培养基中加入5mmol/L的PBA）和香烟烟雾提取物联合苯基丁酸组（CSE+PBA组,培养基中加入10%香烟烟雾提取物以及5mmol/L的PBA）,各组细胞分别处理6h、12h、24h,收集后用于后续实验。通过透射电镜观察细胞内质网形态变化,利用流式细胞仪检测细胞凋亡比例,Western-blot检测CHOP蛋白表达水平,Realtime-PCR检测CHOP mRNA表达水平。P<0.05认为差异具有统计学意义。结果:1.HPAEC^-CHOP细胞CHOP蛋白表达水平较HPAEC细胞降低大于80%,说明CHOP基因沉默达到预期效果。2.透射电镜观察内质网形态。Ctrl组以及PBA组HPAEC细胞内质网形态正常,CSE组HPAEC细胞出现内质网肿胀（表现为体积增大和折叠变平变浅）,CSE+PBA组HPAEC细胞内质网肿胀程度较CSE组HPAEC细胞减轻。Ctrl组、PBA组以及CSE+PBA组HPAEC^-CHOP细胞内质网形态基本正常;CSE组HPAEC^-CHOP细胞内质网无明显肿胀,但是内质网膜电子密度增高。3.流式细胞仪检测细胞凋亡比例。HPAEC细胞不同处理组相同处理时间比较:PBA组凋亡比例与Ctrl组无差异;CSE组凋亡比例高于Ctrl组和PBA组;CSE+PBA组凋亡比例高于Ctrl组和PBA组,但是低于CSE组。HPAEC细胞不同CSE处理时间组比较,处理12h组高于处理6h组,处理24h组高于处理12h组。HPAEC^-CHOP细胞不同处理组相同处理时间比较:PBA组凋亡比例与Ctrl组无差异;CSE组凋亡比例高于Ctrl组和PBA组;CSE+PBA组凋亡比例高于Ctrl组和PBA组,但是低于CSE组。HPAEC^-CHOP细胞不同CSE处理时间组比较,凋亡比例无显著性差异。相同处理时间HPAEC^-CHOP细胞与HPAEC细胞比较:HPAEC^-CHOP细胞CSE组凋亡比例低于HPAEC细胞的CSE组;HPAEC^-CHOP细胞CSE+PBA组凋亡比例低于HPAEC细胞的CSE组;HPAEC^-CHOP细胞CSE+PBA组凋亡比例低于HPAEC细胞的CSE+PBA组。4.CHOP蛋白表达水平检测。HPAEC细胞不同处理组相同处理时间比较:PBA组CHOP蛋白表达水平与Ctrl组无差异;CSE组CHOP蛋白表达水平高于Ctrl组和PBA组;CSE+PBA组CHOP蛋白表达水平高于Ctrl组和PBA组,但是低于CSE组。HPAEC细胞不同CSE处理时间组比较,处理12h细胞CHOP蛋白表达水平高于处理6h,处理24h细胞CHOP蛋白表达水平高于处理12h。HPAEC^-CHOP细胞不同处理组相同处理时间比较:PBA组CHOP蛋白表达水平与Ctrl组无差异;CSE组CHOP蛋白表达水平高于Ctrl组和PBA组;CSE+PBA组CHOP蛋白表达水平高于Ctrl组和PBA组,但是低于CSE组。HPAEC^-CHOP细胞不同CSE处理时间组比较,细胞CHOP蛋白表达水平无显著性差异。相同处理时间HPAEC^-CHOP细胞与HPAEC细胞比较:HPAEC^-CHOP细胞CSE组CHOP蛋白表达水平低于HPAEC细胞的CSE组;HPAEC^-CHOP细胞CSE+PBA组CHOP蛋白表达水平低于HPAEC细胞的CSE组;HPAEC^-CHOP细胞CSE+PBA组CHOP蛋白表达水平低于HPAEC细胞的CSE+PBA组。5.CHOP mRNA表达水平检测。HPAEC细胞不同处理组相同处理时间比较:PBA组CHOP mRNA表达水平与Ctrl组无差异;CSE组CHOPmRNA表达水平高于Ctrl组和PBA组;CSE+PBA组CHOP mRNA表达水平高于Ctrl组和PBA组,但是低于CSE组。HPAEC细胞不同CSE处理时间组比较,细胞CHOP mRNA表达水平无显著性差异。HPAEC^-CHOP细胞不同处理组相同处理时间比较:PBA组CHOP mRNA表达水平与Ctrl组无差异;CSE组CHOP mRNA表达水平高于Ctrl组和PBA组;CSE+PBA组CHOP mRNA表达水平高于Ctrl组和PBA组,但是低于CSE组。HPAEC^-CHOP细胞不同CSE处理时间各组比较,处理12h细胞CHOP mRNA表达水平高于处理6h,处理24h细胞CHOP mRNA表达水平高于处理12h。相同处理时间HPAEC^-CHOP细胞与HPAEC细胞比较:HPAEC^-CHOP细胞CSE组CHOP mRNA表达水平低于HPAEC细胞的CSE组;HPAEC^-CHOP细胞CSE+PBA组CHOP mRNA表达水平低于HPAEC细胞的CSE组;HPAEC^-CHOP细胞CSE+PBA组CHOP mRNA表达水平低于HPAEC细胞的CSE+PBA组。结论:1.CSE能够诱导人肺动脉内皮细胞凋亡,其机制与内质网应激CHOP凋亡信号通路相关;内质网应激抑制剂PBA能够减轻CSE诱导的人肺动脉内皮细胞凋亡。