不同饵料对虎斑乌贼幼体生长及肠道菌群的影响

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虎斑乌贼(Sepia pharaonis)有生长快、可高密度养殖、肉质鲜美且营养丰富等优点,是人工养殖的良种。随着虎斑乌贼人工养殖技术的突破,其养殖、繁育研究的深入,虎斑乌贼的养殖业发展迅猛。而在人工养殖的过程中也暴露出一些问题,包括乌贼喜食活饵料,但活的饵料价格昂贵且来源不稳定,这也可能是病原体或寄生虫的来源。所以在人工养殖过程中,随着乌贼生长,会对其进行一系列的饵料转换。本研究以虎斑乌贼幼体为实验对象,进行不同饵料投喂,养殖饵料为鲜活糠虾和冰鲜脊尾白虾(Exopalaemon carinicauda,又称小白虾)。在实验过程中,综合运用组织学、酶学以及微生物16S r RNA基因高通量测序技术,分析了不同饵料对虎斑乌贼幼体生长和发育,消化酶和肠道菌群的影响。具体如下:1.不同饵料投喂虎斑乌贼幼体15 d后,对其生长指标进行测量,结果表明投喂糠虾组虎斑乌贼的成活率与小白虾组没有显著差异,特定生长率与增重率显著低于冰鲜小白虾投喂组(P<0.05)。在转换为冰鲜小白虾饵料投喂后,虎斑乌贼幼体的胴长和体重随着养殖时间在不断增长,呈现线性增长,拟合方程为y=0.6937x+1.6853(R~2=0.9451)和y=2.2571e0.4174x(R~2=0.9649)。2.通过对投喂不同饵料期间消化酶的结果分析发现,投喂糠虾时期的淀粉酶活性最高,在投喂冰鲜小白虾后活性不断下降,从0 d到14 d持续性降低,14 d到28 d无显著差异,活力水平趋于稳定(P>0.05);胰蛋白酶活性呈现先上升后下降的趋势,投喂糠虾时期到投喂小白虾时期的7 d呈现上升趋势,7 d到21 d呈现下降趋势,其中21 d胰蛋白酶活性最低,21 d到28 d酶活性显著升高,并且在28 d胰蛋白酶活性最高;虎斑乌贼幼体肝脏的脂肪酶活性总体保持不变,投喂糠虾时期的脂肪酶活性与投喂小白虾时期的0 d、14 d、21 d和28 d的无显著差异,但与7 d差异显著(P<0.05),且7 d的脂肪酶活性最低。通过对虎斑乌贼幼体胃与盲囊的组织学观察发现,投喂糠虾时期胃呈现较薄的肌肉层和表皮层,盲囊也呈现较薄的肌肉层,投喂冰鲜小白虾后28 d,胃呈现较厚的肌肉层和表皮层,盲囊也呈现相对较厚的肌肉层。虎斑乌贼幼体“D”形的胃被腺体包围,由黏膜层,黏膜下层和肌肉层组成,胃的内腔壁衬有简单的表皮层,其由柱状细胞连接。盲囊呈现螺旋状弯曲,与肠相连,也由黏膜层,黏膜下层和肌肉层组成,盲囊壁的黏膜下层突起为许多长的初级叶片,径向延伸并突起次级叶片。从投喂糠虾期到投喂小白虾后28 d,胃的柱状细胞与表皮层边缘清晰,结构完整,盲囊的褶皱结构完整。投喂不同饵料28 d后,胃与盲囊已经完全发育,虎斑乌贼对不同饵料适应的可塑性很高。3.虎斑乌贼幼体在不同饵料投喂期间,肠道菌群在门水平上优势菌群包括放线菌门(Actinobacteria),变形杆菌门(Proteobacteria),芽孢杆菌门(Gemmatimonadetes),酸杆菌门(Acidobacteria)和拟杆菌门(Bacteroidetes)。在投喂不同饵料期间,不同饵料投喂前后虎斑乌贼肠道菌群中优势菌种类相同,其肠道菌群达到了相对稳定的状态。在投喂不同饵料期间,虎斑乌贼的肠道菌群与饵料菌群较水样菌群更为相似。综上所述,虎斑乌贼幼体对不同饵料投喂适应度高,为后续养殖过程中饵料转换提供了基础资料。
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