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离褶伞属真菌(Lyophyllum P. Karst)大多数种具有食用价值和较高的药用价值。该属真菌分类较为混乱,系统发育关系也存在较大的争议。随着生物学技术的发展,分子生物学得到广泛应用,基因或者基因片段用于构建物种系统进化树和物种鉴定受到重视。本文以传统的形态学鉴定为基础,采用PCR产物直接测序获得的云南离褶伞属真菌36份标本的ITS和核糖体DNA大亚基(nrLSU)序列,分别以Ossicaulis lachnopus和O. lignatilis作为外群,运用最大简约法,分别建立了离褶伞属的系统发育树,以期探讨云南离褶伞属真菌的系统发育关系,为云南离褶伞属真菌资源的分类和真菌资源多样性的研究、保护提供参考依据。形态学特征表明：云南离褶伞属真菌至少包括L. fumosum、L. shimeji、 L. rhombicosporum和Lyophyllum sp等4个种。L. fumosum子实体簇生,盖表皮有类似于小山丘的突起,菌柄常弯曲,基部形成一个总的柄基；L. shimeji菌髓菌丝到担子之间有较厚的亚子实层,菌柄下端出现酒坛状膨大；L. rhombicosporum孢子菱形作为新种；L0191、L0218和L0321各形态特征差异较大,分别属于一个种,L1194和L1195属于一个种,但都还不能具体定为哪一个种,统称为Lyophyllum sp.。基于ITS序列构建的离褶伞属系统发育树表明：云南离褶伞属一共分成两个大支,其中Clade I分成6个小支,包括了L. fumosum、 L. cf. fumosum、 L. shimeji、 L. decastes、Lyophyllum spl。CladeII分成了3个小支,包括了L. sykosporum、L. semitale、 L. rhombicosporum、 Lyophyllum sp2、 Lyophyllum sp3、 Lyophyllum sp4。基于LSU rDNA序列构建的离褶伞属系统发育树表明：云南离褶伞属一共分成两个大支,其中CladeⅠ分成5个小分支,包括了L. cf. fumosum、 L. cf. shimeji、 Lyophyllum spl。 Clade II分成了2个小支,包括了L. sykosporum、 Lyophyllum sp2、Lyophyllum sp3、 Lyophyllum sp4。ITS、 nrLSU联合建立的系统发育树显示：云南离褶伞属一共分成两个大支,其中Clade I包括A、B、C三个小支,Clade II包括了D、E两个小支。形态特征与分子数据相结合,可以提出云南离褶伞属真菌各分类单元的依据,即：子实体基部有总的柄基,菌盖表皮有类似于小山丘突起的标本划分为L. fumosum;子实体菌柄下端出现酒坛状膨大,菌髓菌丝到担子之间有较厚亚子实层的标本划分为L.shimeji;受伤后变黑,具菱形孢子的两份标本划分为L. rhombicosporum;形态特征差异较大的L0191、 L0218、 L0321、 L1194、 L1195作Lyophyllum sp.,具体属于哪个种需要进一步的研究分析。形态学上的特征与分子数据基本上是吻合的。