蚊虫是一种重要的外寄生虫,在分类学上,蚊虫属于双翅目昆虫,是世界上第一大疫病传播生物媒介。多巴脱羧酶（Dopa decarboxylase,DDC）是一种吡哆醛-5-磷酸依赖性酶,属于磷酸吡哆醛依赖的天冬氨酸转氨酶超家族。在酪氨酸代谢通路中DDC可催化左旋多巴转化为多巴胺,最终促进黑色素的合成,此通路能够影响蚊虫表皮与卵壳的形成、创口愈合以及昆虫免疫等,所以研究蚊虫的DDC有助于理解蚊虫生理行为及免疫的分子机制,从而为蚊虫的防控提供理论支持。本实验从NCBI的Gen Bank数据库中得到埃及伊蚊DDC（Aedes aegypti DDC,Ae-DDC）和骚扰阿蚊DDC（Armigeres subalbatus DDC,As-DDC）基因序列,通过生物信息学分析,利用MAGE 7构建系统进化树,对DDC蛋白种类分布分析证明,AeDDC与As-DDC蛋白进化高度一致,对信号肽等进行预测分析证明DDC蛋白为非分泌蛋白,对跨膜结构域、蛋白二三级结构等的预测证明埃及伊蚊DDC蛋白为定位于细胞质无跨膜结构的亲水性蛋白。为进一步验证DDC的生化特性及生理功能,首先利用原核表达系统,表达出Ae-DDC和As-DDC蛋白,并以左旋多巴为底物,进行酶活测定并计算酶活力。结果表明两种DDC均对底物多巴有明显的酶活反应,并对两种DDC酶活力进行比较,实验结果表明两者间酶活力差异较小,与蛋白结构预测分析基本一致,说明DDC基因在进化过程中较为保守,对于埃及伊蚊和骚扰阿蚊都非常重要。为进一步探究DDC在蚊虫的功能,本实验选取埃及伊蚊为研究对象,首先通过荧光定量PCR技术构建DDC基因在埃及伊蚊中的时空表达谱,然后利用RNAi技术敲低埃及伊蚊成蚊DDC基因的表达。其时空表达谱结果显示,DDC基因在卵期表达量高于其它龄期幼虫。在不同组织的相对表达量中,DDC基因在卵巢中表达量水平约为胸部的5.35倍,是表皮和中肠的6.63倍和38.9倍。上述结果表明,DDC可能在卵发育时期发挥着重要功能。RNAi结果显示,两个对照组间的产卵量和卵孵化率均无显著性差异（DEPC组产卵量和卵孵化率分别为122个/只蚊和95.1%,P＞0.05;ds GUS组产卵量和卵孵化率分别为120个/只蚊和92.9%,P＞0.05）,但实验组（ds DDC注射组）的产卵量（39个/只蚊）和孵化率（10%）均显著低于对照组（P＜0.0001）。接下来我们也对干扰组卵的抗干燥能力进行了测定,在低湿度条件下（室温26℃,0-5%湿度）,0～10 min之内,对照组蚊卵壳结构和饱和度基本无变化,而ds DDC组蚊卵壳结构出现坍塌,卵饱和度明显下降;30分钟之后,ds DDC组蚊卵已脱水干瘪,而两组对照组蚊卵仍保持较高的饱和度。RNAi介导的Ae-DDC基因沉默后,埃及伊蚊雌蚊的产卵量与卵的孵化率明显降低,并且蚊卵的抗干燥能力出现下降。本研究初步推断DDC基因从埃及伊蚊卵的形成到发育过程起到重要的调控作用。