虾肝肠胞虫（Enterocytozoon hepatopenaei,EHP）自2003年在泰国被发现以来,由于其寄生特性,所需能量从宿主获得,导致其宿主生长发育速度大大减缓,给对虾养殖业造成了巨大的经济损失。针对这一突出问题,本研究主要从以下三个方面,探究槟榔（Areca catechu）提取物对凡纳滨对虾（Litopenaeus vannamei）感染虾肝肠胞虫的防治效果:首先,通过感染虾肝肠胞虫,给予槟榔提取物治疗后,测定对虾体重、体长等生理指标的变化;进一步,建立实时荧光定量PCR（Quantitative real-time PCR,q PCR）标准曲线,量化给予槟榔提取物前后肝胰腺EHP拷贝数变化,同时,结合Masson切片观察肝胰腺病理变化;最后,利用转录组学技术,比较给予槟榔提取物处理前后凡纳滨对虾肝胰腺的差异基因表达,综合分析其防控效果,揭示其作用机制。1.将含有EHP的肝胰腺研磨液倒入对虾饲养桶内,48 h后经q PCR检测EHP拷贝数为1×10~3 copies/μg。此时挑选感染后大小均匀的对虾,分为两组,一组一直维持感染虾肝肠胞虫状态的对虾,记为感染组,一组为感染虾肝肠胞虫后给予槟榔提取物的对虾,记为给药组,将健康的凡纳滨对虾记为对照组。通过分别在EHP感染前后向对虾养殖水体中添加槟榔提取物,比较不同处理下凡纳滨对虾的生理响应,分析槟榔提取物对凡纳滨对虾非特异性免疫性能的影响。结果表明,给予槟榔提取物14天后可显著改善对虾生长性能。与试验第1天相比,给药组在第7天和第14天体重增长率为13.41%和23.37%,体长增长率为4.07%和9.07%。而感染组对虾在第7天和第14天体重增长率为7.69%和10.99%,体长增长率为3.87%和5.66%。相比较健康的对照组对虾,添加槟榔提取物的对虾体重体长基本可恢复至同一水平,而感染组对虾与对照组则有显著差异（p＜0.05）。在整个试验期间,同体重、体长趋势一致,随着饲养时间延长,各组对虾总血细胞数和血蓝蛋白浓度不断增加。试验第7天给药组对虾总血细胞数和血蓝蛋白浓度已基本恢复至对照组水平,而感染组则与对照组有显著差异（p＜0.05）。这可能是由于凡纳滨对虾在感染EHP后通过在水体添加槟榔提取物可积极调动非特异性免疫来抵御EHP感染。2.通过构建与标准质粒拷贝数Cq值相对应的标准曲线,测定重组质粒DNA浓度为109 ng/μL,以针对孢壁蛋白（Spore wall protein,SWP）基因片段的特异性引物SWP-F514和SWP-R514为模板进行实时荧光定量PCR,测定感染组和给药组凡纳滨对虾肝胰腺EHP拷贝数。在试验第1天,感染组和对照组对虾拷贝数无显著差异（p＞0.05）,在第7天和第14天,感染组对虾EHP拷贝数高出给药组17.93倍和90.52倍。Masson切片显示感染组对虾肝胰腺细胞有明显破裂,细胞间隙明显增大,有明显的EHP孢子寄生,而给予槟榔提取物的对虾肝胰腺细胞较少有破裂,在给予提取物14天后细胞基本观察不到EHP孢子寄生。3.对对照组、感染组和给药组对虾进行illumina高通量测序分析,分别得到56634546、52905990和600482292条原始数据,经过数据过滤,剔除低质量条带后得到55221626、51745408和58425750条Clean reads。将得到的23783条基因与九大数据库进行比对,成功注释的基因数量为21641,占比90.99%。在对照组、感染组和给药组对虾肝胰腺中筛选到530条差异表达基因,其中有315个基因表达上调和215个基因表达下调。在GO注释内共有17946个基因被注释到细胞成分（cellular component）、生物过程（biological process）和分子功能（molecular function）的类别中。在KEGG pathway分析中,对照组与给药组有4397差异表达基因,涉及18个代谢通路。在对照组和感染组中差异表达的基因共有4559个,涉及17条代谢通路。给药组和感染组差异表达的基因共有2282个,涉及4个代谢通路。通过对腱糖蛋白和MFS转运蛋白等基因,牛磺酸和次牛磺酸代谢、ECM-受体相互作用等通路进行分析,可以了解凡纳滨对虾在槟榔提取物作用下调动基因应对EHP感染的应答机制,为对虾病害防治提供新思路,可降低对虾养殖户的经济损失。