肿瘤是一种典型的多因性疾病,具有细胞内在基因控制和外部环境因素综合调节的复杂性。肿瘤多药耐药（multidrugresistance,MDR）是导致肿瘤治疗失败的主要原因,但肿瘤产生耐药性的机制尚不明确。胰腺癌是癌症之王,恶性化程度非常高,5年生存率不足8%。临床上对胰腺癌的治疗仍以化疗为主,但极易产生耐药性。Obg-like ATPase（OLA1）是一种NTPase,属于Obg类GTP酶家族的YchF亚族。OLA1既能水解ATP,也能水解GTP,与许多耐药基因类似参与细胞能量代谢。能量代谢异常是肿瘤的显著特征,与肿瘤的药物抵抗性密切相关。目前,还没有OLA1影响胰腺癌耐药性的报道。本研究旨在探讨OLA1对胰腺癌化学耐药性的作用及机制,从而为治疗胰腺癌探索新的途径。（1）通过免疫组织化学分析发现OLA1在临床胰腺癌组织中高表达。根据病人用药情况及对药物应答的分析将临床肿瘤组织分为耐药组及药物敏感组,免疫组化分析发现OLA1在化疗耐药的病例癌组织中高表达。通过对药物敏感细胞系进行短期（short term）药物处理及长期（longterm）获得性耐药性细胞系的构建,发现OLA1随着药物处理时间的增长及耐药次数的增加,OLA1表达逐渐升高。通过在体外及体内水平调控OLA1的表达,观察肿瘤细胞对化疗药物敏感性的变化,结果表明OLA1促进胰腺癌耐药性。（2）通过对OLA1转录组学研究,经DO富集分析发现OLA1可能通过肿瘤干性调控因子SOX2影响胰腺肿瘤细胞干性;通过克隆形成实验、微球体形成实验以及对胰腺肿瘤干细胞表面marker（CD44+、CD133+）及调节细胞干性的基因及蛋白表达的检测,验证OLA1影响胰腺肿瘤细胞干性的调节;通过通路分析软件IPA分析及免疫共沉淀验证发现OLA1直接与SOX2产生相互作用;通过OLA1免疫共沉淀的蛋白质组学分析,发现OLA1与HHIP相互作用。通过原核表达OLA1的His pull down实验证明OLA1与SHH也具有相互作用,荧光共定位分析在细胞核形成OLA1/SHH/HHIP复合物,导致细胞核中HHIP的表达升高而抑制Hedgehog通路负反馈机制。通过NOD-SCID免疫缺陷鼠皮下移植瘤实验验证了OLA1通过SOX2/GLI3/HHIP轴影响胰腺癌细胞干性及耐药性。通过miRNA及其靶基因数据库TargetScan寻找到OLA1的调控miR-34a-3p,通过双荧光素酶报告基因证实miR-34a-3p靶向OLA1 3’UTR492-499序列。通过体外及体内实验证实miR-34a-3p抑制OLA1表达,从而提高胰腺肿瘤细胞对化疗药物的敏感性。（3）通过OLA1转录组学的分析,发现OLA1与肿瘤细胞黏附特性显著相关。通过细胞学功能的分析发现OLA1促进胰腺肿瘤细胞的创伤愈合能力以及细胞迁移、侵袭能力。通过分子生物学水平的分析,发现OLA1通过SNAIL/E-cadherin影响EMT过程,进而影响胰腺癌细胞转移。为了探究OLA1是否在其他肿瘤中调控耐药性,选择了乳腺癌及口腔癌作为研究对象。在乳腺癌中,OLA1高表达促进癌细胞的转移及提高化疗耐药性是通过激活TGFβ/SMAD3轴。在口腔癌中,OLA1通过TGFβ/SMAD2/SMAD4轴抑制OSCC细胞转移。尽管OLA1都是通过TGFβ参与乳腺癌及口腔癌的EMT过程,但是其具体的信号传导机制却采取了两种不同的策略。本研究揭示了OLA1参与胰腺癌细胞耐药性的分子机制,通过调控SOX2/GLI3/HHIP轴促进胰腺肿瘤细胞干性及抑制Hedgehog负反馈并持续激活Hedgehog通路,导致胰腺癌细胞耐药。通过OLA1对不同肿瘤细胞EMT过程的研究,发现OLA1介导癌细胞转移的机制具有组织特异性。本文的研究表明OLA1是潜在的肿瘤耐药靶点,有助于恶性肿瘤分子靶向治疗药物的开发,为新型耐药靶点的研究提供新的方向。