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第一部分SNX32对癫痫发作的调节作用研究癫痫是最常见的神经系统疾病之一。据统计,全球约有7000万癫痫患者,其中约90%患者来自发展中国家,中国约有1000万癫痫患者。癫痫的发病机制十分复杂,目前仍不清楚。尽管越来越多的抗癫痫药物（Antiepileptic drugs,AEDs）被开发用于临床,但仍有大量患者多种药物治疗无效。所以,通过研究癫痫形成机制来寻求新药作用靶点成为了癫痫防治中的重要任务。SNX32是分选连接蛋白（Sorting nexins,SNXs）家族的成员,参与调节内吞途径中的膜运输。根据SNXs家族氨基酸序列分析及功能分类,提示SNX32可能是Retromer复合物的组成部分,而Retromer复合物可以参与突触后膜受体的转运以及突触前膜囊泡循环,进而影响突触传递,调节癫痫发作。目的:探讨SNX32对癫痫的调节作用及其可能的机制,为新的抗癫痫药物的研发提供实验基础。方法:利用免疫荧光技术检测SNX32在人脑皮质以及C57BL/6小鼠皮质、海马中的定位;利用免疫印迹技术研究难治性颞叶癫痫（temporal lobe epilepsy,TLE）患者及两种癫痫小鼠模型中SNX32的表达改变;利用腺相关病毒改变内源性SNX32表达,观察各组癫痫小鼠动物模型行为学的改变;利用在体场电位记录各组小鼠脑电的变化情况;全细胞膜片钳技术检测各组小鼠海马CA1区锥体神经元动作电位（action potential,AP）的改变;利用液相色谱串联质谱（Liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS）定性蛋白质组学对SNX32在神经系统中存在相互作用的蛋白进行鉴定,进一步利用高通量串联质谱标签（Tandem Mass Tags,TMT）定量蛋白质组学进行差异蛋白的鉴定,为SNX32在癫痫中的下游机制提供理论依据。结果:免疫荧光结果提示SNX32在脑中广泛表达,主要定位于神经元而非胶质细胞,在癫痫中定位不发生改变。免疫印迹结果提示SNX32在癫痫患者皮质及两种小鼠癫痫模型脑组织中表达明显增加（P＜0.01）。海人酸（kainic acid,KA）癫痫模型行为学结果表明,与各自的对照组相比,过表达SNX32延迟了自发性发作的出现（P＜0.01）并减少了自发性发作的次数（P＜0.05）,而抑制SNX32则促进了自发性发作的出现（P＜0.05）并增加了自发性发作的次数（P＜0.01）。戊四氮（pentylenetetrazole,PTZ）慢性点燃模型中,与各自的对照组相比,过表达SNX32降低了各时间点的平均发作分级（P＜0.05）,提高了点燃过程的生存率（P＜0.05）,抑制SNX32增加了各时间点的平均发作分级（P＜0.05）,降低了点燃过程的生存率（P＜0.05）。在体场电位记录发现,与各自的对照组相比,过表达SNX32降低了30分钟内癫痫样放电的次数和总时间（P＜0.01）,抑制SNX32增加了癫痫样放电的次数和总时间（P＜0.01）。全细胞膜片钳结果提示,与各自的对照组相比,过表达SNX32降低了动作电位的频率（P＜0.01）,抑制SNX32增加了动作电位的频率（P＜0.01）。LC-MS/MS鉴定出141个与SNX32相互作用的蛋白。GO（Gene Ontology）富集分析发现互作蛋白与突触及突触形成相关。TMT定量蛋白质组学鉴定出726个差异显著的蛋白,其中上调462个,下调264个。GO富集分析发现差异蛋白与突触形成、非对称突触、神经元间突触、突触后致密区、突触后特化等相关。根据统计效能分析发现SNX5、SNX6和VPS26差异显著,提示SNX32可能与囊泡逆转运复合物Retromer相关。结论:干预内源性SNX32可以调节癫痫发作,过表达SNX32使癫痫发作活性降低,抑制SNX32使癫痫发作活性增加。其可能通过Retromer复合物影响突触传递参与癫痫发作过程。第二部分自身免疫性脑炎的流行病学调查近年来,随着越来越多的神经元自身抗体被检测并用于临床诊断,以及临床医生对自身免疫性脑炎的认识不断普及及深入,自身免疫性脑炎的发病率呈逐年上升趋势。然而,迄今为止尚无针对成人及儿童自身免疫性脑炎的大样本流行病学调查,其流行特征尚不清楚。了解自身免疫性脑炎的流行病学特征,能够帮助我们更好地认识其发病规律,更快地作出诊断,从而改善患者的预后。目的:了解中国西南地区重庆市明确诊断为自身免疫性脑炎且神经元自身抗体阳性的189例患者的流行病学特征,从而更好的认识疾病的发展规律,为临床决策及预后分析提供依据。方法:回顾重庆市6家大型综合医院,于2012年1月至2018年2月期间明确诊断为自身免疫性脑炎且抗体阳性的189例患者的临床资料。分析基线人口统计学特征,并利用χ2检验、Fisher精确检验、独立样本t检验或配对样本秩和检验分析不同年龄、性别人群疾病严重程度的差异,Spearman相关性分析明确抗体滴度与疾病严重程度的相关性。结果:抗体阳性自身免疫性脑炎患者,女性多于男性,儿童及青年占绝大多数。抗体构成上,抗NMDA受体脑炎占绝大多数。在抗NMDA受体脑炎的抗体检测中,脑脊液抗体敏感性较血清更高,脑脊液抗体滴度较血清更高。男性及儿童更易出现癫痫发作。女性预后较男性好,成人较儿童更易患非NMDA受体脑炎,成人也更易合并肿瘤。此外,脑脊液抗体滴度与入住ICU、使用呼吸机及合并肿瘤情况呈正相关,这些指标侧面反映了疾病的严重程度。结论:中国西南地区重庆市的自身免疫性脑炎有其自身的流行病学特征。认识其规律及特点有助于我们更好的认识疾病,相对更快地做出诊断,改善患者预后。