CRF及其受体在豚鼠胃肠道神经系统的表达及功能的研究

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研究背景和目的:肠易激综合征(irretable bowel syndrom,IBS)是最常见的一种功能性肠道疾病,大量的实验和临床资料证实,精神应激及对应激的情绪应答与IBS的发病和恶化密切相关.方法:第一部分:CRF在豚鼠胃肠道神经系统的表达.1.免疫荧光组织化学单染色和双标记染色.2.RT-PCR.第二部:CRF在豚鼠胃肠道神经系统中的生理作用.1.CRF对离体豚鼠结肠肠肌层神经元的兴奋性作用.2.CRF与肠道神经组织中SP的关系.第三部分:CRF<,1>及CRF<,2>受体在豚鼠胃肠道神经系统的表达.1.免疫荧光组织化学单染色和双标记染色.2.RT-PCR.3.增强化学发光蛋白免疫印迹法对CRF<,1>受体蛋白表达的鉴定.结果:第一部分:CRF在豚鼠胃肠道神经系统的表达.第二部分:CRF对豚鼠胃肠道神经系统生理功能的影响.第一节CRF对离体豚鼠结肠肠肌层神经元的兴奋性作用.第二节CRF与肠道神经组织中SP的关系.第三部分:CRF<,1>及CRF<,2>受体在豚鼠胃肠道神经系统的表达. 结论:1.在豚鼠胃肠道神经系统中(肠肌层神经丛和黏膜下神经丛)中有CRF mRNA 的表达及形态为Dogiel Ⅰ型的CRF-IR神经元分布.在黏膜下层神经丛 CRF-IR的神经元可能为非胆碱能分泌运动神经元,肠肌层神经丛中的 CRF-IR神经元可能为兴奋型的运动神经元和上行的中间神经元.2.CRF是强力的肠道神经系统兴奋性神经递质,可诱发结肠肌层神经元发 生慢的兴奋性去极化.对CRF产生兴奋性反应的神经元是表达CRF<,1>受体亚型的神经元.3.CRF可通过其受体的作用使离体肠道神经组织中SP的含量升高.4.在豚鼠的肠道神经系统,包括粘膜下层神经丛和肠肌层神经丛均存在表达CRF<,1>受体的神经元,绝大多数的形态为Dogeil Ⅱ型.在黏膜下神经丛表达CRF<,1>受体的神经元可能为内在初级传入神经元及胆碱能分泌运动神经元,在肠肌层神经丛表达CRF<,1>受体的神经元可能是肠道神经系统的内在初级传入神经元和/或中间神经元.
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