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本文应用垂直平板不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳方法研究了泥鳅和大鳞副泥鳅成体的肝脏、心脏、脑、性腺、肌肉、血液等6种组织中MDH、LDH、POD、G6PDH、a-AMY、SOD、EST,、ALP、CAT、ATP、ADH和ME等12种同工酶的表达情况,在此基础上研究分析了黄河流域、长江流域、珠江流域两种泥鳅六个群体前10种同工酶的遗传变异情况,并对两种泥鳅胚胎发育过程中的10个不同时期MDH、LDH、SOD、EST、ATP、ME等6种同工酶表达的变化进行了初步分析。
通过对6种组织12种同工酶的组织特异性研究表明两种泥鳅12种同工酶不仅存在不同程度的组织差异,而且两种泥鳅种间及雌雄个体间也存在较大的差异。大部分同工酶在肝脏和卵巢中表达活性较高且同工酶类型较多;两种泥鳅在LDH、MDH等同工酶存在较大的差异,可作为两种泥鳅种间的生化遗传标记;两种泥鳅共发现EST-5、G6PDH-2、ADH三条雌性特异性条带,可作为两种泥鳅雌雄个体的生化遗传标记,也可为两种泥鳅性别决定机制的研究提供线索。
对不同地理居群两种泥鳅的遗传变异情况进行了居群遗传多样性、居群内遗传结构、居群间遗传关系三个水平上的分析研究。在所分析的30个基因位点中,以P0.99为标准,两种泥鳅分别检测到7~9个多态位点,其多态座位比率为0.2333~0.3000,平均杂和度的预期值为0.05865~0.07629,在淡水鱼中处于较高水平;两种泥鳅六个群体的遗传偏离指数都为负值,内繁育系数都大于0,基因分化系数很低,说明两种泥鳅群体遗传结构不够合理,可能会对以后两种泥鳅种质资源的保持产生较大影响;就居群间遗传关系看,两种泥鳅种内遗传相似性很高,最高可达0.9989,说明三大流域两种泥鳅群体从分类上应当还同属于一个种群。两种泥鳅种间的遗传距离平均值0.2933,已达到种间水平,从生化遗传方面,证明了泥鳅和大鳞副泥鳅的分类地位。
此外本文还研究了两种泥鳅个体发育过程中受精卵、囊胚期、原肠胚期、神经胚期、肌节期、尾芽期、孵出期、眼黑色素期、鳔一室期、卵黄吸尽期等10个时期,6种同工酶的酶谱变化情况。结果表明两种泥鳅胚胎发育的电泳图谱不仅显示出明显的发育阶段差异性,而且与成体组织表达也有一定差异,但大多数酶随发育渐趋复杂。两种泥鳅取自同一地区两对亲本所发育的胚胎,其EST同工酶的个体发育谱式具有明显差异,讨论了这种被称之为个体发育多态性的现象,同时讨论了单胚胎电泳分析方法的创新意义。