肺纤维化是肺组织异常修复造成不可逆损伤的一类疾病,其死亡率高、预后极差、发病机制尚不明确,目前无特效药治疗。本研究拟采用博莱霉素(BLM)建立小鼠肺纤维化模型为基础进一步筛选肺纤维化生物标志物,为深入研究肺纤维化发病机制及动物临床治疗肺纤维化和研发新药提供科学基础。选用C57BL/6雄性小鼠40只随机分为阴性对照组和模型组,模型组按BLM摄入浓度分为2.0mg/kg、3.5mg/kg、5.0mg/kg,每组10只。除对照组用生理盐水代替外,其余各模型组采用气管内滴入法注入不同浓度BLM建立肺纤维化模型。于28d后利用小动物活体成像系统观察靶标物在体内动态分布情况,眼球采血分离血清用于ELISA检测血清中MMP7、KL-6/MUC1、SP-A、SP-D的含量。麻醉处死后左肺用4%多聚甲醛固定行HE及Masson染色;右肺用于提取肺组织总RNA,采用Real-time PCR法检测肺组织中MMP7、KL-6/MUC1、SP-A、SP-D mRNA的表达量;免疫组化法观察MMP7、KL-6/MUC1蛋白在肺组织的表达及分布情况,Western Blotting方法检测肺组织中MMP7、KL-6/MUC1蛋白表达量。实验结果显示:BLM摄入后对小鼠体况、体重、生存率均有影响,BLM摄入浓度与肺泡炎肺纤维化程度直接相关,浓度越高死亡率也越高,故成功建立模型3.5mg/kg是较为理想的摄入浓度;MMP7、KL-6/MUC1、SP-A及SP-D四种标志物联合检测可提高敏感性,是肺纤维化较为理想的生物标志物,对肺纤维化早期诊断和预后判断具有重要意义;体外观察MMP7的分布与体内检测结果一致,活体成像技术能够更加直观观察肺纤维化动态发病过程,或可成为今后肺纤维化机制研究方向。本实验用BLM诱导小鼠肺纤维化建立动物模型,不同浓度的BLM造模肺组织表现出不同的病理变化,MMP7、KL-6/MUC1、SP-A及SP-D在小鼠血清、肺组织中的表达量与对照组相比差异显著,故联合检测或可作为肺纤维化早期诊断的标志物。MMP7、KL-6/MUC1、SP-A及SP-D在肺纤维化发病机制中可能发挥重要作用。生物标志物为肺纤维化今后的研究方向提供新思路。