自身抗体的精密测定及其诊断价值

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目的:自身抗体的检测在自身免疫性疾病(AID)的诊断,判断疾病的严重程度及治疗效果方面拥有重要的临床意义。随着免疫检测技术的进步,新的自身抗体特异性靶抗原被发现,自身抗体的检测技术也越来越多,出现如何评估自身抗体检测方法及诊断价值的新问题。本文旨在通过对系统性红斑狼疮(SLE),非系统性红斑狼疮自身免疫病和非自身免疫病的患者自身抗体的测定,将精密的自身抗体测定方法与常规的方法进行比较,评估前后两种方法的优越性,同时与其他相关免疫指标一同判断其诊断价值。方法:实验对象为来自大连医科大学附属第一医院的风湿免疫科和肾内科等患者135例,对照组20例,选择来自本院的健康体检者。健康体检者,物理查体正常,各主要脏器无显著性病变,无糖尿病等慢性病史。自身免疫病患者为初次住院或复发住院未用激素等药物前。实验分组情况:根据疾病的不同,即是否为自身免疫性疾病,是否为SLE,共分为四组:工组SLE组33例;II组其他AID组的59例,包括类风湿性关节炎(RA)患者21例,混合性结缔组织病(MCTD)患者15例,干燥综合症(SS)患者13例,系统性硬化症(SSc)患者5例,多发性肌炎皮肌炎(PM/DM)患者5例;III组非AIDs组43例,包括冠心病患者12例,肾病患者15例,恶性肿瘤患者8例,肺炎患者8例;IV组健康对照组20例。采用酶联免疫吸附抗核抗体谱(EIA-ANA)法检测各组研究对象的自身抗体,包括dsDNA、组蛋白、核糖体P蛋白、nRNP、Sm、SS-A、SS-B、Scl-70、Jo-1、着丝点),同时用间接免疫荧光法(ⅡF-ANA)测定各组的抗核抗体(ANA),底物为Hep-2细胞和鼠肝;同时测定各组的RF和ASO,和其他免疫指标IgG, IgA, IgM>补体C3和补体C4。下面指标凡是高于最低检测线的均进行倍比稀释:EIA-ANA的稀释体系为1:200,1:2000,1:20000,1:200000,1:2000000;IIF-ANA法为欧蒙稀释体系:100,1:320,1:1000,1:3200,1:10000;其他免疫指标为1:2,1:4,1:8,1:16.1:32等。最后进行公式计算作为精密测定结果,各个指标的临床实验室结果作为常规结果。利用SPSS11.5统计软件进行统计分析。多组间比较利用方差分析,两种方法的相关性采用Spear相关性分析。结果:①精密与常规EIA-ANA检测结果并不完全符合,存在15例不相符标本(Ⅰ组4例,Ⅱ组5例,Ⅲ组6例),不相符均为常规EIA检测阴性而精密EIA检测阳性,表明精密EIA-ANA敏感性可能较好。②精密EIA-ANA测定同常规的IFA-ANA测定一样,均能检测到自身免疫性疾病(Ⅰ组和Ⅱ组)中高效价的ANA,但精密EIA-ANA不像常规IFA-ANA检测到非自免病(Ⅲ组)中低效价的ANA,表明前者特异性可能好于后者。精密EIA-ANA法与常规IFA-ANA法检测155例研究对象的ANA结果显示Spearman相关系数r为0.673,二者平均符合率为72.9%,二者具有较好相关性;测定39例SLE组和20例对照组的ANA的符合率达到84%以上,非SLE自免病符合率较低为71%,非自免病组符合率最低为58%。③精密RF同常规RF一样,检测非SLE自免病(Ⅱ组)RF是高效价的,也同样检测SLE组中RF是低效价,两种方法平均符合率达98.71%;精密ASO测定同常规ASO符合率达100%。④其他免疫指标测定结果:补体C3和C4在各组间差异极显著(P<0.001),与对照组相比,SLE组的C3和C4明显降低,其他各组变化不显著。免疫球蛋白IgG、IgA和IgM在各组间差异不显著(P>0.05)。结论:精密测定自身抗体法可能提高抗核抗体的检测效果。
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